在自噬过程中,LC3-I 会被包括 Atg7 和 Atg3(分别对应 E1 和 E2 样酶)在内的泛素样体系修饰和加工,与磷脂酰乙醇胺(PE)相偶联,形成 LC3-II 附着到自噬体的膜上,是自噬体的结构蛋白。在自噬体和溶酶体融合后,位于外膜上的 LC3-II...
图2A:实验组LC3II减少,表示细胞内自噬小体减少;P62减少,表示自噬小体降解被加速。综合来看,实验组可能促进了自噬小体进入溶酶体的降解过程,所以LC3II会减少。整体上,实验组促进了自噬流。 图2B:实验组LC3II减少,表示细胞内自噬小体减少;P62增多,表示自噬小体降解被阻滞。综合来看,实验组可能既抑制了自噬小体生成,...
细胞实验，分组：空白组，刺激造模组，刺激造模+3MA，刺激造模组LC3II在增加，刺激造模+3MA，LC3II进一...
利用E64d和pepstatin A各 20μg/mL同时处理 HEK293细 胞不同时间,观察不同作用时间对LC3Ⅱ和p62表达的影响,结果显示E64d和pepstatin A可时间依赖性地上调 LC3II和p62的表达(图 5-C,D)。 3 细胞自噬调节剂的细胞毒性 为明确上述...
检测LC3II/LCI: lc3参与自噬的形成,自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),LC3II升高代表自噬的启动;2.检测P62:P62可以通过自噬来降解,因此P62可以反映自噬的强弱。当LC3 II升高,P62同时降低,表明自噬流通畅;如果LC3II 升高,P62升高,表明自噬起始正常,但下游不通...
自噬形成时，胞浆型LC3（即LC3-I）会酶解掉一小段多肽，转变为（自噬体）膜型（即LC3-II），因此可利用WB检测LC3-II/I比值的变化以评估自噬的强弱。此外自噬衔接物如sequestosome 1（SQSTM1，也称为p62）也可用于检测自噬，p62蛋白水平的多少与自噬强弱有着反比例关系。2.3荧光蛋白标记检测 2.3.1 GFP-LC3 ...
为了比较作用于不同靶 点的细胞自噬调节剂对LC3II和p62表达的影响,分别利用以mTOR依赖或非依赖方式活化细胞自噬的雷帕霉素或海藻糖、 抑制自噬起始的3 甲基腺嘌呤、抑制自噬小体与溶酶体融合的巴弗洛霉素A1以及抑制溶酶体酶活性的E64d和pepstatinA 处理HEK293细胞,通过Western杂交检测LC3II和p62的表达。结果显示,雷帕...
(No.201601114);山西中医药大学博士启动基金资助项目(No.2015BK16)多种细胞自噬调节剂对自噬标记物 LC3II 及 p62 表达的影响魏砚明1*,任晋宏1,栾智华2 ,王永辉 2(山西中医药大学 1 制药与食品工程学院;2 实验中心,晋中 030619)摘要 利用 Western 杂交检测自噬标记物 LC3II 和 p62 的表达是评价细胞自噬活性...
内容提示: 分类号:R575.1 学校代码: :10392 学科专业代码:105101 学学 号:2161003493 硕士 学位 论文 白 自噬相关蛋白 LC3-II 、Beclin-1 和和 P62 在原发性胆汁性胆管炎患者肝组织中的 表达及其意义 Expression and Significance of autophagy-related proteins LC3-II 、Beclin-1 and P62 in the Pathogenesis...
三、Western Blot检测LC3和p62蛋白的表达量 ① 利用Western Blot检测LC3-II/I比值的变化以评价自噬形成(图1)。自噬形成时,胞浆型LC3-I会酶解掉一小段多肽,随后跟PE结合转变为膜型的LC3-II。因此可以通过LC3-II/I比值的大小估计自噬水平的高低。 图1. WB检测自噬通量示意图(Yoshii, S.R. and N. Mizushima...