1、使用多种蛋白酶组合酶切的方式对蛋白进行酶切,提高酶切效率,以便获得蛋白每一个氨基酸的序列信息。 2、使用 Nano-LC-MS/MS 液质联用高分辨平台对样品进行分析。 3、将得到的质核比信息与理论序列建立的数据库进行比对。 4、拼接每种酶切方式鉴定到的肽段,得到蛋白是否完整正确表达的信息。 实验仪器: 液相...
LC-MS/MS蛋白鉴定 * 技术原理 质谱是将待测物质变为气态离子并将离子按质荷比(m/z)进行分离和分析的一种方法。蛋白先经胰蛋白酶消化成肽段,肽段在质谱仪中离子化后,会带上一定量的电荷,通过检测器分析,可得到各肽段的质荷比(m/z),即一级质谱图;为获得肽段更详细的序列信息,部分肽段再次被破碎和分析...
蛋白LC-MS/MS分析是将蛋白用蛋白酶酶切消化为肽段混合物,这些肽段经高效液相色谱分离,再由串联质谱进行分析鉴定。蛋白LC-MS/MS鉴定步骤:收集样本后进行总蛋白质提取→消化切割蛋白为多肽片段→高效液相色谱(HPLC)分离→分级进入质谱(MS)电场进一步离子化→MS获得各离子质荷比和峰型信息→软件计算氨基酸组成→...
通常情况下,同一细胞/组织的蛋白样品,在不同时间/不同环境条件下蛋白谱的表达也存在不同,可通过蛋白LC-MS/MS分析对其进行表征和详细分析。 蛋白LC-MS/MS分析是将蛋白用蛋白酶酶切消化为肽段混合物,这些肽段经高效液相色谱分离,再由串联质谱进行分析鉴定。蛋白LC-MS/MS鉴定步骤:收集样本后进行总蛋白质提取→消化...
蛋白LC-MS分析可用于蛋白分析与鉴定,它首先使用蛋白酶将蛋白酶解为相应肽段,然后对产生的肽段进行分离和离子化,之后根据质量和片段将每个带电荷的肽段分配给蛋白质。一次质谱分析可鉴定出5,000多种蛋白质,具体数量还取决于上游样本制备和基质。百泰派克生物科技采用Orbitrap Fusion质谱平台,Orbitrap Fusion Lumos质谱...
LC-MS技术在差异蛋白研究中发挥着重要的作用,具有以下几个应用方面:2.1差异蛋白的鉴定:通过LC-MS技术,可以对生物样品中的蛋白质进行高通量鉴定,发现在不同生理或病理状态下表达差异显著的蛋白质。2.2蛋白质定量:利用LC-MS技术的定量功能,可以对差异蛋白的表达水平进行准确的定量,比较不同样品之间的差异。2....
液相色谱-质谱联用 (LC-MS) 是一种强大的技术,经常用于检测和定量生物大分子,特别是蛋白质和其他生物分子的修饰。组蛋白修饰是一种重要的表观遗传现象,涉及到组蛋白的氨基酸残基(如赖氨酸和精氨酸)上的化学修饰。这些修饰可能包括乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化和其他多种修饰。图1.组蛋白翻译后修饰鉴定研究...
血清LC-MS测蛋白质就是利用LC-MS技术对血清中的蛋白质进行鉴定。由于血清中含有各种蛋白质、多肽、脂质、糖类和无机化合物等,需要通过液相色谱技术将血清中的混合物与多种组分进行分离,再将分离得到的不同蛋白质组分利用质谱技术进行高灵敏度的质量检测,最后将质谱数据与蛋白数据库中的数据信息进行比对分析,从而...
LC-MS/MS即液相色谱串联质谱技术,用于混合物的分离纯化和定性定量鉴定,是蛋白质组学分析中的常用技术。LC-MS/MS将液相色谱与质谱技术联合起来,利用液相色谱技术实现混合物中各组分的分离纯化,质谱技术可对一定纯度的化合物进行定性定量以及结构分析。液相色谱与质谱技术优势互补,联合使用可实现复杂样品中各组分的...
蛋白质组质谱分析LC-MS/MS可以帮助我们研究蛋白质的结构和功能。构建序列图谱是蛋白质组质谱分析的关键步骤之一,可以通过数据库搜索法和谱库搜索法实现。构建序列图谱的意义在于确定蛋白质的序列和修饰信息,鉴定未知蛋白质,以及进行定量分析。 百泰派克生物科技——生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商 ...