3、实验过程 3.1 取样 将污水检材样品解冻并充分摇匀,加入浓盐酸调节pH值至小于2,使用溶剂过滤器和玻璃纤维滤膜过滤,取滤液待分析用。在固相萃取之前,取50mL已过滤样品加入100μL内标混合溶液(25ng/mL)。 3.2 固相萃取净化 按照图1所示的方法进行样品的固相萃取净化步骤,收集洗脱液待浓缩。 图1 固相萃取方法 3.3 ...
接下来收集上清液冻干并加入 100 µL 复溶剂,充分溶解后冷冻离心取上清转至 LC-MS 样本瓶待测(图 2)。 3.QC(Quality Control)样本准备:每样本中取出 10 µL 混合成 QC 样本。 图2. 血浆样本代谢组提取过程示例[3] ■Part 3:仪器检测 LC-MS检测仪器多种多样,小伙伴可以根据研究设计与实验条件自行选择...
洗脱液在60℃条件下氮吹至近干,加入1mL 96%甲醇进行复溶,然后过0.22μm滤膜转移至样品瓶待 LC-MS/MS分析。 1.2.2加标样品测定 取6个15mL离心管,分别加入500μL牛血清、内标(20ng/mL)和全氟化合物标准溶液(20ng/mL)各50μL,然后按照步骤1中的操作进行前处理,最后得到样品加标溶液待LC-MS/MS分析。 1....
主要是通过对结合位点突变后的蛋白进行泛素化程度分析,如果发现蛋白泛素化未发生,则说明此位点明显是潜在修饰位点。虽然可以根据不同实验具体情况进行调整,但是此方法不失为一种研究蛋白泛素化功能的普适方法。 (可留言索要详细Protocol) AIMS---蛋白质谱服务商,提供快速便捷的 LC-MS/MS 蛋白定性/定量检测。 www.aim...
样品制备是LC-MS蛋白组学中至关重要的步骤,它直接关系到后续分析的准确性和可靠性。高质量的样本制备需经过精细的设计和操作。最常用的方法包括组织破碎、蛋白质提取、酶切等步骤。通过这一系列步骤,我们可以从原始样本中获取到包含目标蛋白质的,适合进行后续分析的样本。第二章节:液相色谱-质谱分析 液相色谱-质谱...
实验操作步骤一、实验说明《临床色谱质谱检验技术》Ü实验目的:Ü掌握LC-MS/MS、UHPLC仪器结构组成及其检测原理;Ü掌握检测滤纸干血斑中氨基酸和酰基肉碱、检测血清中25-羟基维生素D、检测血清中维生素A的操作步骤,了解其临床意义;Ü实验安排:分4个小组进行,轮流交替完成不同实验内容,每个实验配备1名实验带教...
脱落酸(ABA)是一种重要的植物激素,在植物生长和发育过程中发挥重要作用。ABA在植物体内含量较低,因此对其准确检测具有挑战性。近年来,液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)已成为植物激素分析的重要手段,具有高灵敏度和高选择性。本文旨在优化LC-MS检测ABA的方法,提高检测灵敏度和准确性。材料与方法 1. 材料 实验...
2、实验介绍 皮质醇是一种重要的压力激素,在医学、生物学和心理学等领域具有广泛的研究价值。液相色谱串联质谱法(LC/MS-MS)是目前测定皮质醇浓度的最常用方法之一。3、检测指标 4、实验步骤 1.样品制备:采集待测生物样品,如血清、尿液等,加入内标稳定同位素皮质醇,进行蛋白质沉淀或提取等样品前处理步骤。2...
使用液相色谱法联合串联质谱法(LC/MS/MS)测定血浆中的总同型半胱氨酸 (一)标本 以含有EDTA的真空採血采器採血4.5mL(BD Vacutainer Systems),将血液收集管立即放置在冰上,在3500×下离心5分钟。分离血浆,在-20℃下保存直至分析时。 (二)试剂 1、Recipe-GmbH的同型半胱氨酸试剂盒(Sandstra?e 37–39,D-80335...