测定km值的方法 有几种常见的方法可以测定底物浓度与酶速率之间的Km值。 1.双倒数法(Lineweaver-Burk法):该方法通过将酶速率的倒数与底物浓度的倒数绘制成直线,然后通过直线与x轴的交点来确定Km值。 2.直线法(Hanes-Woolf法):该方法将底物浓度除以酶速率绘制成直线,Km值可以通过直线与y轴的交点确定。 3. ...
（2）Km值测定 三、结果与分析 1、结果 滴定的直接数据。2、分析 ①被分解的H2O2（mg）=[空白滴定值(mL)－样品滴定值(mL)]×c×34.34/2②H2O2酶活性=被分解的H2O2量（mg）×酶液稀释倍数/样品重（g）×时间（min）式中：C为Na2S2O3摩尔浓度34.34为H2O2的摩尔质量 ③Km值计算：以不同底物浓度为横坐标...
（2）Km值测定 三、结果与分析 1、结果 滴定的直接数据。2、分析 ①被分解的H2O2（mg）=[空白滴定值(mL)－样品滴定值(mL)]×c×34.34/2②H2O2酶活性=被分解的H2O2量（mg）×酶液稀释倍数/样品重（g）×时间（min）式中：C为Na2S2O3摩尔浓度34.34为H2O2的摩尔质量 ③Km值计算：以不同底物浓度为横坐标...
二、实验原理底物浓度对酶促反应速度的影响n米氏方程Vmax VK SmS02468101214161820020406080100C oncentration of S ubstrate(um ol/L)Rate of Reaction(v)Lineweaver-Burk双倒数作图测定Kmn米氏常数是酶的特征性物理常数。一个酶在一定条件下,对某一底物有一定的Km值。111max maxKmVVSV本实验测定胰蛋白酶水解酪蛋白...
km值测定实验误差原因以及改进方法 1、km值测定实验误差原因 1.Km是酶的特征常数,与底物浓度和酶的浓度都无关,但是测定时的pH值,温度,离子强度,激活剂等因素都会影响测定的Km值。 2.抑制剂影响。竞争性抑制,Km值增大,Vmax值不变。非竞争性抑制,Km值不变,Vmax值变小。反竞争性抑制,Km值变小,Vmax值变小,但...
测定Km值的方法有：分光光度法、化学发光法、流式细胞仪分析法以及新型测定方法等。分光光度法是一种经典的测定Km值的方法。这种方法利用酶促反应速率与底物浓度的关系来求解Km值。其操作简便，且灵敏度较高，适用于大多数实验室。化学发光法是一种新型的测定Km值的技术。该技术基于酶促反应产生的化学...
脲酶Km值测定-上海液质检测 一、目的 脲酶是氮素循环的一种关键性酶，它催化尿素与水作用生成碳酸铵，在促进土壤和植物体内尿素的利用上起有重要作用。对其进行多方面研究，早已引起人们重视。通过本实验，学习脲酶Km值的测定方法。二、原理 脲酶催化下列反应：在碱性条件下，碳酸铵与奈氏试剂作用产生橙黄色的碘化双...
双倒数法是一种常用的测定酶的底物浓度对反应速率的影响的方法，其中km值是衡量酶与底物之间亲和力的指标。对于双倒数法测定km值，以下是一些注意事项：1. 选择适当的底物浓度范围：为了准确测定km值，底物浓度应该选择在一个能够明显改变反应速率的范围内，但也不能选择太高或太低的浓度。2. 绘制双倒数...
生化试验实验km值的测定.pdf,底物浓度对酶促反应速度的影响——Km 值的测定 一、目的 1.了解底物浓度对酶促反应速度的影响。 2 .学习测定 常数的原理和方法。 二、原理 当底物浓度在较低浓度范围内时,随着底物浓度的增加,酶促反应速度也随之增加。 当底物浓度增加到一定
生化实验课件：Km值测定 碱性磷酸酶AKP(Alkalinephosphatase)Km值的测定 原理：在其他因素不变的情况下，底物浓度对 反应速度的影响呈矩形双曲线关系。VVmaxVmax/2 Ｖ──＝Vmax[S]Km+[S]Km [S]①双曲线作图法：即根据米-曼氏方程，以v对[s]作图，Vmax/2时[s]即为Km，以摩尔浓度表示。VVmaxVmax/2 Km 因...