2) 贴壁细胞: 注:若用荧光分光光度计或流式细胞仪检测贴壁细胞,可先对贴壁细胞进行消化、收集,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。若用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜检测,方法如下: a. 以 6 孔板为例,每孔加入 1 mL 细胞培养基。 b. 阳性对照的设置:取适量 CCCP (50 mM) 恢复至室温,阳性对照孔培养基中加入 ...
再加入1ml JC-1染色缓冲液重悬细胞,600g,4℃,离心3-4分钟,沉淀细胞,弃上清。 (6)再用适量JC-1染色缓冲液重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。 注意:对于贴壁细胞,如果希望采用荧光分光光度计或流式细胞仪检测,可以先收集细胞,重悬后参考悬浮细胞的检测方...
7、洗涤:孵育结束后,弃去上清,用JC-1染色缓冲液(1×)洗涤2-3次后,加入2mL PBS或培养基(可含血清)。 8、观察拍照:荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。激发波长通常为488nm,发射波长为红色荧光590nm,绿色荧光530nm。细胞凋亡水平降低时,线粒体膜电位升高,即红色荧光较强;当细胞凋亡水平升高时,线粒体膜电位降...
（3）用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察：方法同下面的步骤6。6. 荧光观测和结果分析：检测JC-1单体时可以把激发光设置为490nm，发射光设置为530nm；检测JC-1聚合物时，可以把激发光设置为525nm，发射光设置为590nm。注意：此处测定荧光时不必把激发光和发射光设置在最大激发波长和最大发射波长。如使用荧光...
6)荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。 5.对于纯化的线粒体 1)把配制好的 JC-1 染色工作液再用 JC-1 染色缓冲液(1x)稀释 5倍。 2)0.9 mL 5 倍稀释的JC-1染色工作液中加入 0.1 mL 总蛋白量为 10～100ug 纯化的线粒体。 3)用荧光分光光度计或荧光酶标仪检测:混匀后直接用荧光分光光度计进行时间...
荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。 对于纯化的线粒体: 把配制好的JC-1染色工作液再用1×JC-1染色缓冲液稀释5倍。 0.9mL 5倍稀释的JC-1染色工作液中加入0.1mL总蛋白量为10～100μg纯化的线粒体。 用荧光分光光度计或荧光酶标仪检测:混匀后直接用荧光分光光度计进行时间扫描(time scan),激发波长为485nm...
e. 加入 500 μL 的 PBS (1×),用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察 (绿色荧光:Ex/Em=510/527 nm,可用 FITC 通道;红色荧光:Ex/Em=585/590 nm,可用 PE/PI 通道)。 是不是很简单?动动手指,分享一下,再也不用担心师弟师妹不会用 JC-1 啦!
8、观察拍照：荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。激发波长通常为488nm，发射波长为红色荧光590nm，绿色荧光530nm。细胞凋亡水平降低时，线粒体膜电位升高，即红色荧光较强；当细胞凋亡水平升高时，线粒体膜电位降低，即红色荧光减弱，或者呈现绿色荧光。二、注意事项：1、洗涤时，不可将枪头对着细胞，以免冲掉细胞...
免疫荧光实验,自噬荧光,线粒体膜电位JC-1,ROS荧光,tunel凋亡染色,EDU增值染色,铁死亡染色,外泌体,吞噬,死活染色,单标,双标,多标,共定位。 激光共聚焦拍摄,可趋势定制,可代拍, 保证数据唯一,不重复,交付数据后立刻删掉 - 瑞贝医学实验室于20240929发布在
(6) 荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。 5. 对于纯化的线粒体 (1) 把配制好的 JC-1 染色工作液再用 JC-1 染色缓冲液(1×)稀释 5 倍。 (2) 0.9mL 5 倍稀释的 JC-1 染色工作液中加入 0.1mL 总蛋白量为 10～100μg 纯化的线粒体。