jc-1共聚焦步骤 JC-1是一种荧光染料,常用于测定细胞线粒体膜电位。其共聚焦显微镜观测步骤如下: 1. 将待测细胞接种在共聚焦培养皿中,使其附着并生长至适当的数量。 2. 用PBS缓冲液洗涤细胞1~2次,以去除培养液和细胞碎片等。 3. 将含1µM JC-1的PBS加入共聚焦培养皿中,孵育30分钟至1小时,使JC-1...
成像方案包括不同细胞类型的JC-1染色条件,例如粘附细胞和游离细胞。 获取用于成像的JC-1染色方案 JC-1染料的替代品 虽然JC-1染料被广泛使用,但在流式细胞术中有适合不同滤光片的替代试剂,有使用单发射、非比率试...
1、细胞准备(贴壁细胞):将细胞传至共聚焦皿,并缓慢摇动至均匀,培养至80-90%。 2、JC-1染色工作液配制:取50μL JC-1(200×)加入8mLPBS稀释JC-1,再加入2mL JC-1染色缓冲液(5×),混匀后即为JC-1染色工作液。 3、洗涤:弃去培养基,用PBS洗2-3次。 4、染色:加入1mL JC-1染色工作液,并充分混匀。
JC-1是一种常用的荧光探针，用于检测线粒体膜电位的变化。当线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体基质中形成红色荧光；当线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体基质中，呈现绿色荧光。一、实验步骤如下：1、细胞准备（贴壁细胞）：将细胞传至共聚焦皿，并缓慢摇动至均匀，培养至80-90%。2、JC-1染...
1、细胞准备(贴壁细胞):将细胞传至共聚焦皿,并缓慢摇动至均匀,培养至80-90%。 2、JC-1染色工作液配制:取50μL JC-1(200×)加入8mLPBS稀释JC-1,再加入2mL JC-1染色缓冲液(5×),混匀后即为JC-1染色工作液。 3、洗涤:弃去培养基,用PBS洗2-3次。
若用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜检测,方法如下: a. 以 6 孔板为例,每孔加入 1 mL 细胞培养基。 b. 阳性对照的设置:取适量 CCCP (50 mM) 恢复至室温,阳性对照孔培养基中加入 1 μL,其终浓度为 50 μM,轻摇混匀,细胞培养箱 37℃ 孵育 5 分钟。 c. 取适量 JC-1 (3 mM) 恢复至室温,每孔培养...
7. 用流式细胞仪或荧光分光光度计检测分析结果,或者用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察结果。 贴壁细胞 对于贴壁细胞,可以先收集细胞,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。 纯化线粒体 1. 把配制好的JC-1 染色工作液再用JC-1孵育缓冲液(1×)稀释5 倍。
(5)用JC-1染色缓冲液洗涤2次:加入1ml JC-1染色缓冲液重悬细胞,600g,4℃,离心3-4分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入1ml JC-1染色缓冲液重悬细胞,600g,4℃,离心3-4分钟,沉淀细胞,弃上清。 (6)再用适量JC-1染色缓冲液重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析...
JC-l染色非常简单。首先可将成品JC-1以DMSO配成储存液(1～5mg/ml),储存于-20℃,用时以培养液稀释至10ug/ml终浓度。对贴壁细胞可以直接弃去培养液,漂洗细胞后直接加入染色液,10-30min后在荧光显微镜下或者激光共聚焦下观察。线粒体状态好时细胞以绿色为主,当红光信号增强时,红绿相叠,以橙色为主。该染色运用...
■细胞染色 悬浮细胞和贴壁细胞的使用方法基本相同 (详细说明戳MCE 产品使用指南丨JC-1 使用指南),我们以贴壁细胞为例: 注:若用荧光分光光度计或流式细胞仪检测贴壁细胞,可先对贴壁细胞进行消化、收集,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。若用荧光显微镜或共聚焦显微镜检测,方法如下: ...