一、免疫沉淀技术(Immunoprecipitation, IP) 免疫沉淀技术(Immunoprecipitation, IP)主要原理是根据抗原和抗体的特异性结合,利用抗体将靶标蛋白(即抗原)分离出来,只是为了检测某一种蛋白的表达情况。co-IP、ChIP、RIP等技术由IP演化而来,可以用来研究与蛋白结合的分子。 二、免疫共沉淀技术(co-Immunoprecipitation, co-IP...
IP(Immunoprecipitation,免疫沉淀)与Co-IP(Co-Immunoprecipitation,共免疫沉淀)是生物化学和分子生物学研究中常用的两种技术,主要用于研究蛋白质之间的相互作用。以下是这两种技术的详细比较: 一、基本原理 IP(免疫沉淀) IP是一种利用特异性抗体与目标蛋白结合,从而从复杂混合物中分离纯化该目标蛋白及其结合分子的方法。
1.提蛋白:10cm的皿细胞长满,每皿根据细胞沉淀大小加IP裂解液(IP裂解液可以保持蛋白与蛋白之间的相互作用,内含蛋白酶抑制剂1:100,蛋白酶抑制剂保证蛋白不被蛋白酶分解),涡旋30min(5min/次),离心13000rpm,4 C,30min。吸取上清为蛋白,尽量不吸取絮状物及沉淀。 2.定量:Input组(留一部分蛋白直接做WB作为对照,...
在生物学研究中,免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)和共免疫沉淀(Co-Immunoprecipitation, CO-IP)是两种常用的蛋白质研究方法。尽管它们在原理和操作上有相似之处,但目的和应用场景存在显著差异。以下是对这两种技术的详细比较: 一、基本原理 免疫沉淀(IP) 原理:利用抗原与抗体的特异性结合以及蛋白质的变性复性原理,从...
IP：即指免疫沉淀（immunoprecipitation），用相应的抗体来纯化富集目的蛋白，例如图中“IP: Flag”的意思是用Flag标签抗体磁珠去拉Flag，与Flag融合表达的蛋白为诱饵蛋白，此时与该融合蛋白相互作用的其他蛋白都会因此被沉淀下来。IB：即指免疫印迹（immunoblotting）或western blot（WB），用来检测目的蛋白的存在与否，...
免疫 (共) 沉淀 (IP/CoIP) 磁珠法VS琼脂糖珠法 免疫 (共) 沉淀 (IP/CoIP)是基于抗体和蛋白的特异性亲和作用，通过捕获与蛋白或抗原特异性结合的抗体，进而从复杂的样品中捕获及富集目标蛋白，同时可以测定与之相互作用的蛋白或其它生物大分子的一种技术。琼脂糖珠VS磁珠 琼脂糖珠作为免疫沉淀实验中的固相支持物...
遇见爱情——Co-IP: 竟然我们在体内验证过,那么蛋白X和蛋白Y在体外是否也存在相互作用了?这个时候我们可以用到CoIP了~ 免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)的原理和IP是一样的,当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质相互作用被保留了下来,假如细胞内存在 XY 蛋白复合物,用 X(X...
一、IP、coIP的应用? 免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是利用抗原抗体特异性反应纯化富集样品中目的蛋白的一种方法。通常使目标蛋白同抗体-protein A/G形成免疫复合物沉淀而得以收集,然后通过WB检测目的蛋白。 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CO-IP)是将样品中同...
而IP/COIP正是研究蛋白相互作用的方法。免疫共沉淀（CoIP）概述及原理 CoIP是研究蛋白－蛋白间相互作用的经典方法，属于免疫沉淀技术的一类，常被用于鉴定特定蛋白复合物的中未知蛋白组分。免疫共沉淀的设计理念是，假设一种已知蛋白是某个大的蛋白复合物的组成成员，那么利用这种蛋白的特异性抗体，就可能将整个蛋白复合...
IP是在已知一种蛋白质的抗体情况下,直接用这种抗体将目标蛋白质提取出来,是一种提纯蛋白质的方法。 免疫共沉淀(CoIP)主要用于检测蛋白质与蛋白质之间连接作用,如你想检测蛋白质A与蛋白质B之间是否有相互作用,你手中又有蛋白质A的特异抗体,就将蛋白质A和抗体加入到含有蛋白质B的细胞解液中去,利用抗体提纯,如果...