ATGC最好随机分布。避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端，容易出现引物二聚体，产生非特异性条带引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基要严格配对，以免末端碱基不配对导致PCR失败引物中加入合适的酶切位点引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其他程序无明显同源性。
若两基因表达效率不同,则形成的IL-12二聚体的活性大大降低,尤其是当p40基因过量表达时,p40单体或其二聚体会明显抑制IL-12的活性。为避免上述不利情况的发生,科学家尝试用如图所示方案构建了含有p40和p35cDNA序列的IL-12融合基因。其中P1、P2、P3、P4为PCR引物。P2和P3除含有与p40基因和p35基因互补的碱基序列外...
ZN-YW013 IL-12 白细胞介素12 人、小鼠、大鼠、兔、猪、鸡、牛、羊 10μM 200μL 258元 引物叙述: 本产品应用于实时荧光定量PCR扩增,为QPCR上下游引物等比例混合物,浓度为正常QPCR使用工作浓度,在20 μLPCR反应体系中,加入1 μL即可。引物设计参考序列均来源于NCBI及Ensembl数据库,设计参数经过特别优化,...
聚合酶链反应(PCR)50μl的反应混合物是在无菌的eppendorf管中加入下列成分来制备的31.3μl的DEPC处理的水,10.0μl 5X的Tris-HCl缓冲液(对每套引物确定其最佳镁含量和pH),2μl第一链合成的cDNA,2μl引物(原液浓度为20μm),5.0μl的dNTP混合物(2.5mM dATP,2.5mM dCTP,2.5mM dGTP,和2.5mMdTTP,pH8.0)(Invi...
[0056]表1引物序列 [0057] 【权利要求】 1.一种表达IL12蛋白的多顺反子表达载体,含有IL12蛋白表达序列,其特征在于,所述IL12蛋白表达序列含有5’至3’方向连接的IL12a基因序列,自剪切多肽2A基因序列,以及IL12b基因序列。 2.如权利要求1所述的多顺反子表达载体,其特征在于,该多顺反子表达载体由所述IL12蛋白表...
测L-12浓度(或 20C保存)。 1.5 L-12mRNA的检测采用RT-PR法。 1.5.1引物合成 L-12引物根据人类基因库设 计,由上海生工有限公司合成。 L-12引物序列为: 正义链(245-264)5*TAGAAATGTAGAAG3*, 反义链(548-529)5’GGATATAGAAGTTTG3*, PR产物304bp。 1.5.2细胞总RNA抽提取2X10 6 未经培养的 PBM ,按...
表1引物序列及扩增参数 . 1.3方法 1.3.1蜡块总RNA的提取:从病理科检验合格的蜡块共60例,切片厚度8μm 5张,按RNA抽提试剂盒说明进行紫外分光光度计检测RNA纯度。放置-80℃冰箱保存。 1.3.2RT-PCR:取1μg总RNA,按照TaKaRa试剂盒说明书进行。其RT反应条件:42℃ 30 min, 95℃ 5min, 4℃ 5 min. cDNA ...
使用 HiScript Ⅲ RT SuperMix for qPCR将1μg RNA反转录为cDNA,然后使用qPCR Master Mix和相应引物进行实时定量聚合酶链反应(qRT PCR)。目标mRNA的表达量与人β-肌动蛋白mRNA的表达量进行比较,并采用−ΔΔCt法对数据进行量化,使...
1.2 克隆质粒p35 NKSF14-1-1 由ATCC提供,NotⅠ/SalⅠ酶切1.3 kb片段包含IL-12 p35的完整编码基因。 1.3 引物设计与合成 根据文献[1]报道的序列,共设计4条引物用于克隆IL-12 p40 cDNA,其中59043:5′-GCCCAGAGCAAGATGTG-3′(2-18),59044:5′-GTCTATTCCGTTGTGTC-3′(1077-1061)为p40的外套引物。55684...
小弟先需要做RT-PCR，求助人IL-10、IL-12引物序列…跪谢 发自小木虫IOS客户端