PDAC的免疫荧光分析突出了IL-1β TAMs在肿瘤核心周围富含成纤维细胞的基质区域中的优先分布;小鼠PDAC单细胞和空间转录组分析也发现了类似的分布,IL-1β TAM区域富集了与炎症、缺氧、血管生成和伤口愈合相关的GO通路。通过免疫荧光分析验证,显示IL-1β TAMs与CD31 VEGFR2内皮细胞和缺氧区域的接近性。因此,IL-1β TA...
在基因水平上检测IL-1β处理后,mtDNA表达量变化→升高 MFI(平均荧光强度);IL-1β处理后,线粒体质量增加,膜电位降低→复合线粒体自噬特点 JC-1 是一种广泛用于检测线粒体膜电Ψm位的荧光探针。 Mitotracker Green是线粒体质量检测染料。 左边是免疫荧光;右图是Qpcr,可看出mtDNA经溴化乙淀处理后释放减少 ethidiu...
IL-1β+ TAM区域富含与炎症、缺氧、血管生成和伤口愈合相关的GO术语,这些结果得到了免疫荧光分析的验证,显示IL-1β+ TAMs靠近CD31+VEGFR2+内皮细胞和缺氧区域。 综上所述,这些发现表明IL-1β+ TAMs在PDAC中经历局部特异性分化,与...
接下来,作者使用免疫荧光染色评估了USP13-Sigirr 关联。MLE12细胞与HA标记的Sigirr和USP13-V5共转染。Sigir-HA和USP13-V5高度共定位于细胞膜内侧,在细胞质中也观察到一些斑点。Co-IP还揭示了USP13与Sigirr的关联。DUB 和跨膜受体蛋白之间的关联可以通过连接进行调节。USP13和Sigirr的复合物在IL-37处理后被破坏...
在小鼠急性肺损伤模型中,气管内用LPS或铜绿假单胞菌(PA103菌株)处理后,小鼠肺部匀浆中的USP13和Sigirr水平也同样下降。免疫组化染色显示,肺上皮细胞中的USP13减少,这与H&E染色和IL-1β丰度显示的炎症损伤增加相关。这些数据表明,USP13在急性炎症损伤期间是下调的。作者评估了LPS诱导的USP13下调的可能分子机制,并...
5.IL1β TAM聚集在缺氧区域 通过免疫荧光分析发现,PDAC的植入模型中,IL-1β TAMs更倾向于分布在丰富成纤维细胞的肿瘤周围的基质区域,而不是肿瘤核心。这种巨噬细胞亚群的分布差异早期出现在小鼠肿瘤中,也在人类PDAC中可检测到。 随后,研究团队进行了小鼠PDAC的单细胞和空间转录组分析。通过基于转录组的细胞亚群解卷...
通过免疫荧光染色(左)和定量(右)(每组n = 4个独立的人类样品)检测,新孢菌素还降低了伤口床表皮中KRT5和IL-1β的表达(箭头所示)。(E)经凡士林和新孢菌素处理的人受损伤皮肤的qRT-PCR mRNA表达分析(每组n = 3个独立的人类样品)。(F和G)微阵列mRNA分析表明,与新孢菌素处理过的皮肤相比,凡士林中与伤口相关...
免疫印迹分析显示,敲除PCAF后,IL-1β对NNT的K1042乙酰化作用显著减弱(图3I)。意外的是,IL-1β对PCAF的总蛋白水平没有影响,而增加了PCAF的线粒体转位(图3J)。 免疫荧光和Duolink邻近连接实验(PLA)显示,正常情况下,PCAF主要定位于细胞核,仅有小部分与NNT共定位。IL-1β处理后,PCAF主要定位于线粒体,并与NNT...
而且在MϕRictor-KO小鼠的动脉粥样硬化主动脉根部,IL1b mRNA的表达高度升高,而且免疫荧光显示IL-1β与巨噬细胞共定位,提示IL-1β炎症通路与巨噬细胞mTORC2缺陷所致动脉粥样硬化密切相关。 图四:mTORC2信号通路敲除诱导的白细胞介素1...
4.阻断IL-1α后不能从GF级SAMP小鼠体内检测到抗炎效果 40周龄的GF级SAMP小鼠与SPF级SAMP小鼠的回肠三维结构炎症表型相似(3A),研究者使用免疫荧光共焦显微镜首次验证了GF级SAMP小鼠体内有IL-1α(3B),然后确定GF级和SPF级SAMP小鼠回肠中IL-1αmRNA表达量是相近的(3C)。用FLO1对GF级SAMP小鼠进行处理,并设置对照...