HLA- A2流式细胞术红细胞裂解目的:探讨流式细胞仪检测外周淋巴细胞 HLA- A2分子的简便方法.方法:健康志愿者新鲜血液,分别用全血染色,加红细胞裂解液裂解方法与密度梯度离心分离 PBMCs后再染色.用 FACSCalibur流式细胞仪检测.结果:两种方法检测结果一致.阳性细胞百分率,荧光强度差异均无显著性 P>0.05.结论:微量全血...
通常,对于每毫升外周血可获得1百万个PBMC,或者典型的去除白细胞(a-pheresis)操作法能产生高达总数为1-10×1010个的PMBC。分离和纯化的PBMC与适当数目的存在抗原的细胞(APC)一起培养。这些APC已先与适当数目的合成的肽(含有HLA结合基本模式和该抗原序列)一起孵育过(或称“脉冲过(pulsed))。在培养基如RPMI—1640...
(e)在异种gvhd小鼠模型中过继转移后的体内细胞移植物,其通过每μl血液随时间推移的pbmc和cartreg移植物的绝对数量所显示。pbmc的数量计算为hcd45+减去在d中门控的总cartreg数。图9.m/ha2car的表达使treg快速和持续地归巢至hla-a2:01+皮肤同种移植物。用编码萤光素酶和对照her2-car、ma2-car或ha2-car(h1k2...
以HLA A2 + 健康人和慢性乙型肝炎患者的PBMC为实验对象 ,进行体外诱导CD8+ T细胞应答的免疫学功能研究.结果 所设计治疗性多肽分子可在体外诱导较强的抗原特异性CD8+ CTL应答 ;" AAA "铰链区设计和"Th +B"细胞表位的引入可增强CTL表位肽的免疫原性.结论 提示在治疗性表位多肽疫苗的分子设计中 ,短而高柔性的"...
目的:探讨体外激发HLA—A2型外周血单个核细胞(PBMC)中的MAGE-A10(254-262)特异性T淋巴细胞及其功能检测方法.方法:分别采用肽段MAGE—A-10(254-262)直接刺激PBMC的Bulk Culture法和自体DC负载肽段MAGEA10(254-262)刺激CD3^+CD8^+法,均经3次刺激进行体外扩增tetramer—MAGE—A10(254—262)阳性T细胞.以人流感病毒...
Peptide-specific CTL-precursors reactive to 16 kinds of vaccine candidates in the pre-vaccination peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were measured, and patients were followed by vaccination with only positive peptides (up to 4 kinds of peptides). Serum prostate-specific antigen (PSA) ...
PBMCs)为效应细胞、同时表达肝素酶和 HLA.A2的人体HCC.LM6肝癌细胞和SW-480结肠癌细胞为靶细胞,效:靶为40:1 时Hpa310-3ls(FLNPDVLDI)刺激效应细胞对HCC.LM6肝癌细胞的溶破率为52.48%, 对SW-480结肠癌细胞的溶破率为44.17%,而其他各条候选肽没有明显的特异性溶 ...
本文采用RT PCR技术从人外周血PBMC中克隆HLA A2基因的胞外区 ,拼接上依赖BirA酶的可生物素化序列后 ,装入pET 42b (+)高效表达载体进行诱导表达。并对表达产物进行纯化与复性。结果成功地扩增出HLA A2基因并测序证实 ;构建了融合表达载体pET HLA A2 ,并获表达与纯化。为研究在原核系统中表达、纯化与复性及进一步...
尽管用已发现的一个MAGE-3 HLA-A2限制性表位在体外可诱导健康人或黑色素瘤病人的PBMC或PBL产生具杀瘤活性的特异性CTL,但体内试验效果却不尽如人意,主要是由于在体肿瘤细胞呈递的此种肽-HLA复合物的量太少造成的[3]。由于HLA-A2阳性人群的比例很高,因而由HLA-A2分子呈递的肿瘤抗原CTL表位在肿瘤免疫治疗中具有...