GST pull down+GST IB组:表示GST pull down实验后用GST进行免疫印迹。发现三组均有条带,表明GST pull down实验体系可以正常发挥功能,也表明各组体系中含有GST相关的组分。 Input + YFP IB组:表示不经过GST pull down实验,直接对实验前各组的混合体系用YFP进行免疫印迹,是阳性对照组表明各组有YFP相关组分。 6、...
四、假阳性率(False Discovery Rate, FDR) 在大规模蛋白质组学研究中,为了控制鉴定结果的质量,通常会设置一定的假阳性率阈值。FDR值越低,说明蛋白质鉴定结果的准确性越高。 以上四个参数是解读GST pull-down质谱分析结果的关键,它们共同决定了结果的准确性和可信度。理解这些参数的含义和重要性,对于正确解读实验结...
为了确定AIB1是否可以直接与NICD结合,将大肠杆菌产生的GST-NICD蛋白与基于大肠杆菌提取物的无细胞蛋白质合成系统产生的AIB1蛋白孵育,进行GST pull down检测是否直接互作。 结果表明,GST-NICD蛋白,而不是GST,能够下调AIB1(图C),表明AIB1可以直接与NICD结合。为了确定AIB1的哪些结构域可以与NICD结合,在293T细胞中表达...
GST pull down实验结果怎么看啊 这张图的主要目的是为了证明GST-Atrogin-1-wt(野生型)和β-catenin在体外的相互作用, 上图是考马斯亮蓝染色的图,看划线的解说,说明实验中是用GST bead与纯化的GST蛋白或GST-Atrogin-1-wt共同孵育,用孵育后的bead来拉裂解液中的β-catenin 下图免疫印迹的,也就是western blot的...
GST pull-down和与CoIP的区别 GST pull-down:原核纯化蛋白与真核蛋白在试管内发生生化反应互作的结果,只要互作蛋白间具有相互结合的结构域基础即可实验证明。Co-IP实验:细胞内高表达目的蛋白,并通过IgG球珠-抗体-蛋白复合物体系,分离出互作的蛋白复合物,是细胞内的体内反应结合。太太太详细了!Co-IP实验全流程标准实...
⽤了多⽀Proteintech抗体，并且研究中进⾏了⼤量的CoIP实验和GST pull-down实验。其中 Fig.2c的CoIP实验结果如下：要想看懂上⾯这个CoIP实验结果图，我们⾸先需要了解以下⼏个关键术语：IP：immunoprecipitation，代表免疫沉淀，富集⽬的蛋⽩；IB：immunoblotting，免疫印迹，即Western Blotting ，显⽰...
在这次实验中，通过GST pull down技术，可以有效地验证GST-Atrogin-1-wt和β-catenin之间的相互作用。具体来说，实验包括两部分，首先是通过考马斯亮蓝染色观察GST bead与GST蛋白或GST-Atrogin-1-wt的孵育效果，以及在孵育后的bead中拉取β-catenin。然后是免疫印迹技术，将相同胶上的蛋白通过转膜转移到...
GST pull-down是体外验证两种蛋白直接相互作用的研究方法,其原理是将目的蛋白与GST融合表达,固定在谷胱甘肽(GSH)亲和树脂上作为与目的蛋白亲和的载体,充当“诱饵蛋白”,捕获相互作用的“捕获蛋白”(靶蛋白),将结合物洗脱后WB分析确认两种蛋白的相互作用。
GST-pull down 主要包括以下 3 部分：①利用基因重组技术构建带有 GST 标签的原核表②通过原核表达系统表达带有 GST 标签的融合蛋白；③利用 GST 亲和纯化柱进行蛋白纯化，获得高纯度的融合蛋白；再利用 GST 亲和纯化柱进行蛋白间的相互作用检测。实验结果 实验组GST-pull down第三列的实验结果可以看出KU-HIS，GST的...