gstpulldown质谱分析结果,看哪个参数 在生物研究中,GST pull-down实验是一种常用的筛选和鉴定蛋白质间相互作用的技术。通过此项实验,我们可以将目标蛋白质与它可能的互作伙伴隔离,并进行进一步的分析,例如使用质谱技术进行蛋白质质谱鉴定。在解读GST pull-down质谱分析结果时,有几个重要的参数需要关注。一、谱图...
GST pull down实验结果怎么看啊 这张图的主要目的是为了证明GST-Atrogin-1-wt(野生型)和β-catenin在体外的相互作用, 上图是考马斯亮蓝染色的图,看划线的解说,说明实验中是用GST bead与纯化的GST蛋白或GST-Atrogin-1-wt共同孵育,用孵育后的bead来拉裂解液中的β-catenin 下图免疫印迹的,也就是western blot的...
实验组GST-pull down第三列的实验结果可以看出KU-HIS,GST的条带中只检测到了GST,说明KU-HIS没有连接到亲和纯化柱上而被洗脱掉了。而在第四列的实验结果可以分别检测到GST与HIS 标签说明KU与TOP6发生了相互作用使得在条带中分别检测到了GST与HIS标签。
在这次实验中,通过GST pull down技术,可以有效地验证GST-Atrogin-1-wt和β-catenin之间的相互作用。具体来说,实验包括两部分,首先是通过考马斯亮蓝染色观察GST bead与GST蛋白或GST-Atrogin-1-wt的孵育效果,以及在孵育后的bead中拉取β-catenin。然后是免疫印迹技术,将相同胶上的蛋白通过转膜转移到...
结果表明,GST-NICD蛋白,而不是GST,能够下调AIB1(图C),表明AIB1可以直接与NICD结合。为了确定AIB1的哪些结构域可以与NICD结合,在293T细胞中表达了不同的AIB1结构域蛋白,并进行了GST pull down实验。结果表明,AIB1的HAT结构域负责AIB1与NICD的相互作用(图D,下图)。
GST pulldown实验是一种常用的蛋白质相互作用分析方法,通过将GST标签融合蛋白与目标蛋白质进行结合,并利用GST标签进行纯化,最终检测目标蛋白质与与其相互作用的蛋白质的存在和互作关系。在进行GST pulldown实验后,需要对实验结果进行分析,以确定目标蛋白和与其相互作用的蛋白的存在和互作关系。
随后再来看GST pull-down之后的实验数据,有两张WB结果图,我们可以看到体系中存在GST-ARF6蛋白时,通过GST pull-down就能将Exportin-5给“拉”下来,反之则不能;并且通过四组实验对比发现;GTP-γ-S的存在能够促进GST-ARF6和Exportin-5的直接相互作用。
2️⃣ pull-down实验,包括磁珠准备、结合诱饵蛋白、结合互作蛋白以及洗脱等步骤; 3️⃣ pull-down后的Western blot检测。 🌟 通过这个实验,我们可以明确地检测到两个蛋白的直接互作关系。而且,实验操作简便,结果也十分明确。 🔬 现在,你是否对GST-pulldown实验有了更深入的了解呢?如果你需要进一步的帮助或...
随后再来看GST pull-down之后的实验数据,有两张WB结果图,我们可以看到体系中存在GST-ARF6蛋白时,通过GST pull-down就能将Exportin-5给“拉”下来,反之则不能;并且通过四组实验对比发现;GTP-γ-S的存在能够促进GST-ARF6和Exportin-5的直接相互作用。