GST 标签融合蛋白纯化 将还原型谷胱甘肽 (GSH) 固定后作为琼脂糖或其他色谱载体的配体时,可对表达为谷胱甘肽 S 转移酶 (GST) 融合的重组蛋白进行高得率和高质量纯化。GST 融合蛋白纯化具有高得率,因为12原子 GSH 连接子极大程度减小了空间位阻。我们提...
自GST融合蛋白亲和纯化法问世以来,GST-pull down技术也随即成为一种研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的热门手段。该技术的原理是:利用重组技术将诱饵蛋白与GST标签融合表达,融合表达的蛋白经纯化后与待测蛋白共同孵育,并用GST琼脂糖凝胶或GST琼脂糖磁珠将其分离下来,再通过SDS-PAGE鉴定待测蛋白与诱饵蛋白的相互作用。这...
GST标签是一种亲和标签,能特异的与谷胱甘肽结合,表现为酶和底物的作用原理,利用这个原理将GST做成标签表达出融合蛋白,与带谷胱甘肽的亲和介质特异性结合纯化出目的蛋白,再用特异性的酶将GST标签切除,从而得到天然蛋白。GST融合蛋白纯化具有纯度高、纯化条件温和、蛋白活性不受影响以及促进蛋白的可溶性表达等优势。因此...
GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF是一种GST标签蛋白纯化树脂,可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。在结构上,该树脂是以高度交联的4%琼脂糖凝胶为基质,通过12个原子的间隔臂,用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成,具有更高的物理化学特性,可以耐受更高的压力...
1.关于GST 谷胱甘肽S-转移酶(GST)是具有多基因、多功能的II相代谢酶家族成员,相对分子质量约26 kDa,是一种大分子蛋白。 1988年,Smith(Royal Melbourne Hospital,Australia)和Johnson(University of Melbourne,Australia)首次提出谷胱甘肽S-转移酶(GST)亲和标签的概念,这是一种可以一步获得高纯度目的蛋白的纯化试验方法...
GST标签的去除如果GST标签需要切除,包含 PreScission™ 蛋白酶识别位点、Thrombin识别位点或Factor Xa识别位点的标签蛋白可以在与GSTrap预装柱结合时或在洗脱后进行标签去除。一般来说,柱上切割是推荐的方法,因为许多潜在的杂质都能被洗掉,目的蛋白洗脱时具有更高的纯度。如果切割条件需要优化,建议在洗脱后进行标签...
而且,GST标签还方便后续的纯化操作,就像给目标蛋白装上了一个特殊的“定位器”,让我们能够轻松地把它从众多的蛋白中找出来。二、表达步骤 1.构建重组表达载体 -首先,我们得选择合适的表达载体,这就像挑选一个合适的房子来住。这个载体要有GST标签的编码序列,同时还要有适合在我们选定的宿主细胞中表达的元件,...
GST(谷胱甘肽S转移酶)能特异的与谷胱甘肽结合,表现为酶和底物的作用原理,从而利用这个原理,将GST做成标签表达出融合蛋白,与带谷胱甘肽配基的亲和介质特异性结合,从而纯化出目标蛋白,再用特异性的酶将GST标签切除从而得到天然蛋白。GST,即谷胱甘肽-S-转移酶,与目的蛋白融合表达后,被称为GST标签重组蛋白、GST标签...
GSTSep Glutathione Agarose Resin是一种GST标签蛋白纯化树脂,结构上以4%琼脂糖凝胶为基质,通过12个原子的间隔臂,用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成。该设计使树脂的纯化效率得到了较大提高,使其每毫升基质可承载>20 mg GST融合蛋白。 此外,本品特异性好,性价
GST标签融合蛋白纯化试剂盒 用途与合成方法 背景 GST标签融合蛋白纯化试剂盒将目标蛋白与GST融合表达,然后利用固定化的谷胱甘肽进行纯化,是比较经典的纯化路线。 简单,快捷,纯度高。 GST标签融合蛋白纯化试剂盒将亲合层析技术与离心柱技术相结合,提供了一种快速简便的融合蛋白纯化途径。