离心后,再次用PBS洗涤细胞一次,并以800r/min的速度离心5分钟。最后,用500ul PBS重悬细胞,并将其置于冰上。在1小时内进行上机检测。遵循这些步骤,你将能够成功地进行Fluo-4 AM实验,并获得准确的细胞内钙离子浓度数据。⚠️小贴士⚠️ 在进行流式实验时,细胞的状态至关重要。若细胞状态不佳,则不应...
流式细胞术检测Fluo 4 一、所需材料:PBS,胰酶,Fluo 4,终止消化液(PBS+1%血清)二、操作步骤 1.6孔板中培养细胞,加药处理24h后,pbs洗3次。配置2uM Fluo 4稀释液(每1mlPBS加1ul Fluo4),每孔1ml,37℃孵育1h。2.PBS洗3次,0.8ml胰酶消化1min,吹下来。0.5ml终止消化液(PBS+1%...
(1)可用于大多数的激光共聚焦测钙系统,包括共聚焦激发扫描显微镜以及流式细胞仪等。 (2)具有良好的染料吸收性能,使得低浓度的探针检测到Ca2+变化,从而降低对活细胞的光毒性。 (3)Ca2+依赖性荧光强度提升,对Ca2+变化水平检测敏感度提高。 (4)降低样品自荧光以及光散射的干扰。 (5)兼容光激活探针以及...
Fluo-4钙离子检测试剂盒是一种基于Fluo-4 AM钙离子荧光探针检测细胞内钙离子浓度的试剂盒。本试剂盒可以使用荧光显微镜进行荧光成像检测,也可以使用荧光酶标仪或流式细胞仪进行荧光的定量检测。使用荧光显微镜或荧光酶标仪还可以进行细胞内钙离子浓度的动态变化检测。Fluo-4是一种将Fluo-3结构中的Cl离子替换成F离子的...
Fluo-4是Fluo-3以两个氟原子取代氯原子的类似物,这一微小的结构变化使得Fluo-4探针在488nm激发光下的荧光信号得到增强,信号稳定持续,可以应用于共聚焦显微镜、流式细胞仪、微孔板读数仪。 Fluo-2、Fluo-3和Fluo-4在与Ca2+结合后荧光增强,与紫外激发的探针fura-2和indo-1不同,不会发生光谱漂移。荧光光密度在...
Fluo-4 AM 是一种常用的检测细胞内 Ca2+ 浓度的探针。储存方式:避光。NP细胞用5 μM Fura-4-AM在37°C的黑暗条件下孵育30分钟。使用特定的Ca2+敏感荧光指示剂Fura-4-AM测量细胞内Ca2+水平,并通过荧光显微镜进行分析 生物活性 体外研究 fluo - 4am是一种荧光染料(λex=494 nm, λem=516 nm)。预加载...
当Fluo-4与钙离子结合时,它的荧光强度会发生变化,通过检测这种荧光信号的变化,可以实时监测细胞内钙离子的水平。 具体来说,Fluo-4与细胞膜结合后,当细胞内的钙离子浓度发生变化时,Fluo-4与钙离子的结合状态也会随之改变,导致荧光强度的变化。通过使用荧光显微镜或流式细胞术仪等设备,可以实时监测这种荧光信号的变化...
是一种常用的检测细胞内 Ca2+ 浓度的探针。储存方式:避光。 NP细胞用5 μM Fura-4-AM在37°C的黑暗条件下孵育30分钟。使用特定的Ca2+敏感荧光指示剂Fura-4-AM测量细胞内Ca2+水平,并通过荧光显微镜进行分析 NP细胞用5 μM Fura-4-AM在37°C的黑暗条件下孵育30分钟。使用特定的Ca2+敏感荧光指示剂Fura-4-AM...
仪器设置:使用荧光显微镜、流式细胞仪等检测仪器时,要根据 Fluo-4 的激发和发射波长正确设置仪器参数。一般 Fluo-4 的激发波长在 488nm 左右,发射波长在 520nm 左右,但不同仪器可能略有差异。同时,要设置合适的增益、曝光时间等参数,以获得清晰、准确的荧光信号。检测环境:检测过程中要保持环境温度稳定,避免...
Fluo-4, AM穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-4,从而被滞留在细胞内,Fluo-4若以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的,但是当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光,激发波长为494nm,发射波长为516nm。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。