Krt14-CreERT2小鼠Cre活性验证 Fig1 体视显微镜检测Krt14-CreERT2+/-; Rosa26 tdTomato+/- 小鼠皮肤(Skin)、舌(Tongue)及食管(Esophagus)中tdTomato的表达。 结果显示:Krt14-CreERT2+/-; Rosa26 tdTomato+/-小鼠经Tamoxifen诱导后,皮肤(Skin)、舌(Tongue)及食管(Esophagus)中有tdTomato的表达(A组),表达...
他们将Myh11-CreERT2-RAD小鼠与两种不同的荧光报告基因小鼠杂交,并通过流式细胞术和免疫荧光分析检测了SMC的特异性标记。 技术路线 01 对细菌人工染色体进行改造,构建Myh11-CreERT2-RAD小鼠 02 通过报告基因表达比较Myh11-CreERT2-RAD与Myh11-CreERT2-Off的活性 03 评估Myh11-CreERT2-RAD转基因驱动的Cre表达...
当Pdx1-CreERT2小鼠与含有loxP位点的小鼠杂交后,经过他莫昔芬诱导可以在子代小鼠的胰腺中引发由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。 Pdx1-CreERT2小鼠在胰腺中的重组效率更高 图2 胰腺中的Cre重组酶表达情况 将Pdx1-CreERT2小鼠与条件性表达tdTomato荧光蛋白的ROSA26-LSL-tdTomato小鼠交配后,通过他莫昔芬或...
Epcam-(CreERT2)小鼠Cre活性验证 图1 免疫荧光检测Epcam-CreERT2+/-; Rosa26 tdTomato+/-小鼠肾脏上皮细胞EPCAM与RFP (tdTomato)的共定位情况。 结果显示:成年小鼠经Tamoxifen诱导后,肾脏EPCAM阳性细胞的胞浆内有tdTomato的表达,证明EpcamCreERT2+/-小鼠中CreERT2在肾脏中的表达类型符合预期。 图2 荧光...
1 构建Myh11-CreERT2-RAD小鼠研究人员首先对BAC克隆进行改造，在小鼠Myh11基因的起始密码子后插入Cre-ERT2表达框，并去除BAC载体骨架上的loxP和loxP511位点。之后将改造后的BAC注射到C57BL/6小鼠受精卵的原核中，使其随机插入基因组。然后将受精卵植入代孕母亲体内，获得携带转基因的后代。Myh11-CreERT2-RAD小鼠的...
为了比较Myh11-CreERT2-RAD与Myh11-CreERT2-Off的活性,研究人员将小鼠与tdTom或eYFP荧光报告基因小鼠杂交,并在小鼠口服tamoxifen后通过共聚焦显微镜或流式细胞术评估荧光蛋白表达(图1)。他们发现,口服tamoxifen可以诱导Cre+小鼠头臂动脉的SMC表达tdTom或eYFP。细胞计数显示,头臂动脉中95%的SMC表达tdTom。
为了比较Myh11-CreERT2-RAD与Myh11-CreERT2-Off的活性,研究人员将小鼠与tdTom或eYFP荧光报告基因小鼠杂交,并在小鼠口服tamoxifen后通过共聚焦显微镜或流式细胞术评估荧光蛋白表达(图1)。他们发现,口服tamoxifen可以诱导Cre+小鼠头臂动脉的SMC表达tdTom或eYFP。细胞计数显示,头臂动脉中95%的SMC表达tdTom。
由于已知Sema3a基因敲除纯合子小鼠具有感觉和交感神经元异常、胚胎骨和软骨结构异常、心脏缺陷和出生后死亡的严重不良表型,故利用经典 ES 细胞打靶技术,将诱导型 CreERT2 插入到小鼠 Sema3a 基因的起始密码子位置,构建Sema3a-CreERT2小鼠模型。 图1. Sema3a-CreERT2构建策略于基因型鉴定结果。
研究人员首先对BAC克隆进行改造,在小鼠Myh11基因的起始密码子后插入Cre-ERT2表达框,并去除BAC载体骨架上的loxP和loxP511位点。之后将改造后的BAC注射到C57BL/6小鼠受精卵的原核中,使其随机插入基因组。然后将受精卵植入代孕母亲体内,获得携带转基因的后代。Myh11-CreERT2-RAD小鼠的构建工作由赛业生物完成。为了确定...
总结 Cyp19a1-IRES-Cre小鼠模型中Cre重组酶的表达主要定位于卵巢颗粒细胞中,同时也可以在脑部的海马区、脑室、纤维束和脑核中的部分细胞中发生由Cre重组酶介导的重组,Cre重组酶的表达与小鼠内源性Cyp19a1基因的表达模式相似,具有良好的特异性。