用DCFH-DA法测ROS时,需要稀释DCFH-DA,一般稀释多少倍好呢?是不同的样品稀释不同的倍数吗?我们实验室做蚯蚓的有稀释100倍的,也有稀释50倍的,我做植物稀释多少倍好?稀释倍数和最后的荧光强度有无关系?是不是只要DCFH-DA浓度够了就可以?多余的会影响测定的荧光强度吗?我看碧云天ROS试剂盒说要稀释1000倍,也可以稀...
按照1:1000用无血清培养液稀释DCFH-DA,使终浓度为10μM。去除细胞培养液,加入适当体积稀释好的DCFH-DA。加入的体积以能充分盖住细胞为宜,通常对于六孔板的一个孔加入稀释好的DCFH-DA的体积为1毫升。37℃细胞培养箱内孵育20分钟。用无血清细胞培养液洗涤细胞三次,以充分去除未进入细胞内的DCFH-DA。 通常活性氧阳...
1、将 H2DCFDA 溶解为 10 mM 的 DMSO 原液,并在使用前用 PBS 进一步稀释。 2、将含有细胞的盖玻片置于 5 µM H2DCFDA 染色溶液中,在 37℃ 下避光孵育 60 min,然后清洗并用配备有氩激光器的共焦激光扫描显微镜 Leica TCS SL 成像。[1] 体内活性 ...
我养大肠杆菌一般是做锥形瓶中培养18-24h，那么是直接用枪头取一定体积的菌液吗？还是稀释一下?然后...