在本研究中,作者使用CRISPR/Cas9系统在小鼠(称为CS-CREM小鼠)中诱导心脏特异性的CREM-IbΔC-X过表达。 靶向策略如图2A所示,通过CRISPR/Cas9基因编辑,将靶基因成功整合到小鼠H11染色体中。对三种高危sgrna进行了可能的脱靶效应试验,研究表明在CS-CREM小鼠中脱靶效应和随机插入CREM-IbΔC-X在C-CREM小鼠中是不可见的。
这是因为小鼠和人类的基因组都包含约 22 400 个基因。约 99% 的小鼠基因可以在人类基因组中找到同源基因,小鼠模型对人类疾病治疗具有重大借鉴意义。 加上近些年魔术剪刀——CRISPR/Cas9 基因编辑技术的出现,让基因编辑小鼠变成了触手可得的科研头牌明星。 那么这把神奇的剪刀是如何起作用的呢?来看看在基因编辑小鼠中...
近日,《生物技术通报》在线发表了题为《利用CRISPR/Cas9技术构建Quaking敲除的小鼠胚胎成纤维细胞株》的研究论文。本研究旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,在小鼠NIH3T3细胞中进行Quaking基因的敲除,建立稳定的小鼠Quaking基因敲除细胞株,并初步...
5. 基因型鉴定(1周) 细胞质注射法获取F0转基因小鼠 CRISPR Cas9蛋白制备流程Cas9蛋白结构 应用 •简化了流程,缩短了制作周期,降低了成本 •可以制作多个基因同时敲除的动物 •可以制作不同种属的基因敲除动物.如猪、牛、斑马鱼 几种常见哺乳动物基因编辑方法比较 ...
加上近些年魔术剪刀——CRISPR/Cas9 基因编辑技术的出现,让基因编辑小鼠变成了触手可得的科研头牌明星。 那么这把神奇的剪刀是如何起作用的呢?来看看在基因编辑小鼠中的应用吧。 第一步 确定修饰的目的基因 构建小鼠前,需要先明确研究涉及的基因。一般分为 2 种情况: ...
我们通常拿到手的基因编辑鼠是F1代杂合阳性鼠,杂合阳性鼠自交的后代会有三种表型(野生型,纯合子,杂合子),需要鉴定纯杂合。下面介绍不同类型的基因编辑鼠F1代及以后的基因型鉴定。 (1) F1代阳性杂合鼠(+/-)鉴定 ● 引物设计 将引物设在敲除片段的两端,野生型小鼠可以扩增出KO鼠缺失的片段。不过需要注意的是,...
1、CRISPR / Cas9能够清除HD 140Q-KI纯合小鼠纹状体中mHTT的表达 研究人员先是构建了一个亨廷顿舞蹈症模式小鼠,该小鼠拥有人的mHTT基因,用于替换其体内正常的亨廷顿蛋白编码基因(normal huntingtin, nHTT)拷贝。在大约9个月大的时候,运动问题和mHTT蛋白聚集就能够在这些小鼠中观察到。
利用CRISPR/Cas9技术构建定点突变小鼠品系 CRISPR/Cas9 技术原理 CRISPR/Cas9 系统源于细菌的适应性免疫防御机制。其中,Cas9 是一种核酸内切酶,在整个基因编辑过程中起着 “分子剪刀” 的关键作用。而引导 RNA(…
双荧光素酶报告系统证实,小鼠 MSTN 3′ UTR 突变可以为 mmu-miR-1/206创建一个 tar-get 位点。利用 CRISPR/Cas9基因编辑技术构建了 MSTN 3′ UTR 突变的 C2C12细胞模型。然后分析突变 C2C12细胞模型中 MSTN 的 mRNA 和蛋白表达。 结果显示,突变阻断了 MSTN 的转运水平。通过抑制 mmu-mir-206,MSTN 蛋白在...