图1 Co-IP结果示例图(A代表protein A和B有相互作用,B代表protein A和B之间不存在相互作用) 对结果进行分析之前,还需要了解图中的标注都是什么含义: IP:即指免疫沉淀(immunoprecipitation),用相应的抗体来纯化富集目的蛋白,例如图中“IP: Flag”的意思是用Flag标签抗体磁珠去拉Flag,与Flag融合表达的
|Co-IP结果分析案例一 该图为验证蛋白EDR1与蛋白EDR4之间是否存在相互作用的结果图。由图中可以得到,蛋白EDR4带有GDP标签,蛋白EDR1带有FLAG标签,该实验为利用蛋白标签来沉淀和检测蛋白;该co-ip实验实验被分为两组,第一组存在GFP标签及EDR1-FLAG蛋白,第二组存在EDR4-GFP蛋白及EDR1-FLAG蛋白;图中共有三组胶图...
好不容易会做了实验，读懂了结果图，做出来的结果却千奇百怪，也不知道是哪里出了问题。 今天整理了CO-IP常见的6大异常条带，逐一分析了造成的原因以及改进办法！✅在IP实验过程中，检测到的相互作用蛋白的信号较弱？✅在IP实验中，背景信号偏高或者检测到了非特异性的信号？✅在Input泳道中未检测到目标蛋白...
结果分析主要观察IP结果中各蛋白条带的有无及其相互作用关系。通过实验组与对照组的比较，可以判断是否存在特异性的蛋白质复合体。理想的结果显示，阳性对照中有清晰的蛋白条带，而阴性对照中没有非特异性条带。同时，实验样本的检测有助于验证推测的蛋白质相互作用关系。不同实验设计的延展，还可以进一步揭示蛋白质的...
2~5泳道结果表明在GFP-PRMT1的K82R、K202R和K325R突变体中也可以观察到PRMT1泛素化的增加,而在K37R突变体中则没有。此外,过表达FLAG-FBXO7导致野生型PRMT1水平明显下降,但对其表达无明显影响。 以上就是今天关于【Co-IP】的相关内容,继续期待下期【文献读图】的精彩内容吧~...
由于BiFC系统无法避免自激活荧光，因此，作者进行了Co-IP分析来进一步验证。结果表明AtMPC1可以与AtMPC2或AtMPC3互作形成复合物（图6）。图6 用Co-IP检测AtMPC1与AtMPC2或AtMPC3在体内的相互作用(He et al., 2019)。用FLAG抗体检测FLAG::AtMPC1，用C-MYC抗体检测C-MYC::AtMPC2和C-MYC::AtMPC3。IB：免疫印迹...
2 操作步骤与结果分析Co-IP 实验流程图 2. Co-IP 实验流程图[1][5]。Co-IP 流程 (以内源性 Co-IP 为例)[1]1样本准备采用适当的方法收集细胞，使用含有合适的蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液裂解细胞。2固相介质准备将含有保护液的蛋白 A/G 磁珠或蛋白 A/G 琼脂糖混匀取出，用平衡液清洗磁珠/琼脂糖凝胶。3...
5. 结果检测 Western Blot：用目标蛋白B的抗体检测洗脱样品。数据分析：对比实验组与对照组的条带差异，验证相互作用。★注意：增加在洗脱之前的洗涤次数或在免疫共沉淀缓冲液中加入 Triton X-100 ，可以降低非特异性结合，以防止蛋白在阴性对照树脂实验样品中被检测到。4Co-IP实验注意事项 1.抗体选择 使用已验证...
Input组：提供原始样品中蛋白的表达情况，作为实验的参考。IP组：显示与特定抗体结合的蛋白复合物。COIP组：揭示目标蛋白之间是否存在相互作用。分析标签和沉淀结果：标签：如GFP、FLAG、Myc等，用于标记目标蛋白，帮助识别和分析。沉淀结果：观察沉淀物中是否包含预期的蛋白复合物，从而判断蛋白间是否存在相互...