如果目标是表达该基因,那么只需扩增CDS区即可。若想要扩增全序列,则需要在引物设计时特别注意前后端的选择。然而,基因的3'端通常是Poly T序列,这意味着在进行逆转录时需要添加一个适配器,以便能够完整地扩增出目标序列。这个过程相对来说较为复杂。全长基因序列较长,因此在设计引物时,必须考虑到PCR扩增的长度。使用高保真的DNA
解析 不,需要两条,因为随着你PCR的进行,另一条互补链会被引物扩增出来,因此你需要两条引物都加进去. 分析总结。 不需要两条因为随着你pcr的进行另一条互补链会被引物扩增出来因此你需要两条引物都加进去结果一 题目 反转录PCR引物如何设计?已经得到cDNA第一链,引物设计是以cdna为模版,设计上下游引物吗?cDNA不是...
解析 如果是要表达该基因的话把CDS区扩增出来就可以了 想扩增全场的话只能引物设计在前后端了 不过后面是Poly T,所以估计反转录的时候得加一个adapter 这样才能扩增完整的出来 还是比较麻烦的 而且全长的话太长了 要用高保真的酶 很容易出现错配和突变
如果是用在原核上,没有多大的却别,但是如果用在真核上,cDNA扩增出来的产物就比DNA直接扩增出来的短。因为cDNA是RNA逆转录过来的,而DNA里面除了RNA上面相对的片段还有内含子的片段,在扩增的时候内含子的片段同样能被扩增出来...序列不一样 引物当然不一样 你在cDNA上设计的引物可能在基因组上被内...
如何设计引物呢?你就当它是双链设计。另一个primer对应虚拟的互补链。当PCR进行的时候,第一个循环...
1. 基因组的提取是不是真的没有错误。2. 引物的设计是不是正确,如果是选在两个外选子之间,那样会有特异的序列(外显子和内含子连接处序列有特异性)3 PCR程序有没有优化,如果前面两点都没问题,那么你可以考虑做一下优化。前面100bp一般都会是引物二聚体,你可以看看你设计的引物之间是不是...
以cDNA第一链为模板的PCR是以什么设计引物的 相关知识点: 试题来源: 解析 一般以mRNA为模板设计引物扩增目的片段. 结果一 题目 以cDNA第一链为模板的PCR是以什么设计引物的 答案 一般以mRNA为模板设计引物扩增目的片段. 相关推荐 1 以cDNA第一链为模板的PCR是以什么设计引物的 ...
若对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测,结果发现有两个或多个条带,从引物角度分析,原因可能是___。 相关知识点: 试题来源: 解析 (1)引物是根据Wx基因的一段已知序列设计合成的(或引物能与Wx基因的cDNA特异性结合) (2)碱基互补配对G、C含量高 (3)引物与模板链结合过于紧密,变性时引物不易与模板链脱离(...
Primer-BLAST,在线设计用于聚合酶链反应(PCR)的特异性寡核苷酸引物。 这个工具整合了目前流行的Primer3软件,再加上NCBI的 Blast进行引物特异性的验证。Primer-BLAST免除了用另一个站点或工具设计引物的步骤,设计好的引物程序直接用Blast进
Real-TimePCR FengYidong 160000 140000 120000 100000 80000 60000 40000 20000 00100200300 不对称PCR 降落伞PCR 梯度PCR 实时荧光PCR 免疫PCR 锚定PCR 固着PCR 膜结合PCR RT-PCR长距离PCR 巢式PCR 原位PCR PCR与数据处理目的基因查找 NCBI维基百科文献 定量方法 mRNA-cDNA 引物的设计 NCBI文献 ...