解析 20ul体系 2ug RNA 1ul OligodT 加水至11ul 70°10min 冰上冷却 0.5ul 酶 0.5ul RNA酶抑制剂1-2ul dNTPbufferDEPC 水结果一 题目 PCR时,将RNA反转录成cDNA反应体系怎么算 答案 20ul体系 2ug RNA 1ul OligodT 加水至11ul 70°10min 冰上冷却 0.5ul 酶 0.5ul RNA酶抑制剂1-2ul dNTPbufferDEPC 水相关推荐 1PCR时,...
PCR反应体系中加入相当于2ng RNA 逆转录的cDNA 怎么理解?有具体换算吗?0评论 +关注 共3个回答 傲气,工艺专业主任 2019-08-23回答 应该就是用RNA的量除以你样RNA的浓度,得出你要往体系中加的量,但是要注意单位换算,例如你需要反转2微克,样品RNA浓度为500纳克每微升,所以需要加4微升,然后用水补足至终体积。
这是第一次听说，一般的试剂盒都是要求反转录的体系里面加多少RNA。个人觉得你要得到确切的cDNA的量，...
1、PCRPCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应,是指在DNA聚合酶催化下,以母链DNA为模板,以特定引物为延伸起点,体系中加入dNTP、Mg2+以及延伸因子、扩增增强因子,通过变性、退火、延伸等步骤,体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程,能快速特异地在体外扩增任何目的DNA。2、热启动PCR常规PCR的扩增开始...
A、由题干信息“RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的多聚酶链式反应(PCR)相结合的技术”分析可知,RT-PCR以RNA为模板来合成DNA,故该体系应含有反转录酶,A正确;B、该体系是通过控制温度使反应在体外反复进行,不需要ATP提供能量,无需加入ATP,B错误;C、PCR操作中,当温度上升到90℃以上时,双链DNA解旋为单链,当...
cDNA—SCoT差异显示分析是应用于植物基因差异表达研究的一项新技术。本研究以甘蔗品种桂糖11号根尖为材料.提取总RNA并反转录第1链cDNA.对影响甘蔗cDNA—SCoT差异显示PCR反应的cDNA模板、SCoT引物、dNTPs、TaqDNA聚合酶和Mg2+等因子进行优化,建立甘蔗cDNA—SCoT反应体系,同时应用优化后反应体系分离25%PEG6000胁迫诱导甘蔗...
(1)从cDNA文库中获取的目的基因 无 (有/无)启动子.实现①过程常用PCR技术扩增.该技术的原理是 DNA的双链复制 .在PCR反应体系中应含有扩增缓冲液、4种原料、模板DNA、引物及 热稳定DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶) . (2)②表示 基因表达载体 ,其中标记基因的作用是 鉴别受体细胞中是否含有目的基因 . ...
现利用PCR等技术扩增该基因,具体原理如下图所示,其中①③表示有关过程,ⅠⅢ表示有关物质。请回答下列问题:(1)过程①反应体系中,需要加入___ 种引物,还需加入___ 酶,生成杂合链物质Ⅰ。 (2)利用DNA末段转移酶催化过程②,使cDNA单链左侧末端增加十多个腺嘌呤脱氧核苷酸序列(AAA(A)n),其目的是___,进而利于...
解答 解:(1)过程Ⅰ是由mRNA形成cDNA的过程,表示逆转录,需要加入缓冲液、原料、RNA提取物、逆转录酶和引物A等.(2)过程Ⅱ首先要将反应体系的温度升高到95℃,其目的是让逆转录酶变性失活、使mRNA-cDNA杂合双链解开,该反应体系中所用的Taq酶至少应能耐受95℃高温.(3)决定RT-PCR扩增片段的是引物;过程Ⅱ拟对单...
[解析]解:(1)从B细胞中获取到人的抗体基因的mRNA,经逆转录形成cDNA,然后利用PCR 技术进行扩增。扩增时,反应体系中的模板DNA解链为单链,应将温度加热至90~95℃。 [解析](2)基因工程中,受体细胞为大肠杆菌细胞时,常用 Ca^2+处理大肠杆菌,使之处于感受态,即 Ca^2+参与的转化法。噬菌体DNA与外壳蛋白组装成完...