2.检测方法在对应的检测时间点，从培养箱取出细胞，每孔加入10μL的CCK-8试剂，避光反映1-4h（具体孵育时间根据细胞数决定，一般OD值在0.8-1.5时线性最佳），在酶标仪上450nm下检测OD值，检测前需震荡混匀。注：换液和不换液均可。若检测完以后第二天还需要再一次检测，则全部吸出黄色反应液，再加入新鲜培...
小M: 将不含细胞的待测溶液孔中加入 10 μL CCK-8 溶液，孵育 1-4 h 后，测定在 450 nm 处的空白吸光度。若测得的吸光度很小，则说明含有较少的还原剂，正式实验可以直接加入 CCK-8 进行检测；若测得的吸光度相对较大，则说明存在较多还原剂，正式实验时需去除培养基，将细胞洗涤两次后，再加入新的培...
1、在96孔板中配置100μL的细胞悬液。将培养板放在培养箱预培养24小时(37℃,5% CO2)。 2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。 3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。 4、向每孔加入10μL CCK溶液(注意不要再孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。 5、将培养板在培养...
CCK-8是一种高灵敏度、无放射性的比色检测法,用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数量,可替代传统的MTT法,常应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。尽管有人戏称CCK-8测细胞增殖实验只要有试剂盒就“有手就行”,但实际操作中仍有许多细节需要注意。本期细胞学堂将详细介绍CCK-8法的原理、...
使用酶标仪在450nm波长处测OD值,可间接性反应活细胞的数量。是一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。 因此,CCK-8实验可用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。 操作步骤 ...
4、CCK-8 的实验方法与步骤 应用场景一：细胞活性检测 1. 收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，96孔板每孔加入 100ul， 使待测细胞密度为1,000～10,000细胞/孔。2. 5% CO2，37℃ 培养细胞 24 小时（培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少进行调整）。3. 每孔加入10ul CCK-8 溶液。如果...
10μL 0.1 M 的 HCl 溶液或者 1% w/v SDS 溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24 小时内测定，吸光度不会发生变化。Q：用CCK-8测细胞活力时每次都要做标准曲线吗？建议每次做，虽然细胞是一样的，但是细胞的状态不一定一样。对于状态不一样的细胞，建议每次做标准曲线。#细胞增殖# ...
CCK-8 的实验方法与步骤 ☆实验一:细胞活性检测 1.收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,96 孔板每孔加入 100 μL, 使待测细胞调密度至 (1,000~10,000)/ 孔。 2.5%CO2,37℃ 培养细胞 24 小时(培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异)。
CCK-8是 Cell Counting Kit-8的简称,CCK-8性能很稳定,在室温避光的情况下可以保存6个月,在2-8℃可以保存2年,-20℃以下可以更长时间保存。 优点:(1)比MTT更敏感;(2)对细胞无毒性(3)步骤简单(4)性能稳定等。 原理 Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒),是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝...
CCK-8检测细胞活性 (2)收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100 μL ,铺板使待测细胞调密度至1000~10000/孔,(边缘孔用无菌PBS填充)。 (3)5% CO2,37 ℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入100 μL上述稀释好的浓度梯度的RA,每个浓度设置五个空白对照,并设置细胞空白孔和培养基空白孔。