如果影响比较小或者没有影响,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。 6)向每孔中加入10μl CCK-8溶液,由于加入的CCK-8量比较少,可能会因试剂沾在孔壁上而带来误差,建议在加完试剂后轻轻晃动培养板以帮助混匀,或者直接配置含10%CCK-8的培养基,以换液的形式加入。另外注意,加样的过程中...
CCK-8 溶液可以直接加入到细胞样品中,不需要预配各种成分。 02 原理 WST-8在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色,细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大, 则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系 。 03 操作过程 1. 制作标准...
(3)可能是在换液过程种没有将孔内的液体洗净就加入了新的培养基。 (4)可能是加入的CCK-8试剂微量没有加准。为避免这种情况,可以直接配制含10% CCK-8的培养基,以换液的形式加入96孔板中,每孔100μl。 计算方法 细胞抑制率 =(对照-实验)/(对照-空白)×100% 对照:具有细胞、培养基、CCK-8的孔的OD值 ...
(3)可能是在换液过程种没有将孔内的液体洗净就加入了新的培养基。 (4)可能是加入的CCK-8试剂微量没有加准。为避免这种情况,可以直接配制含10% CCK-8的培养基,以换液的形式加入96孔板中,每孔100μl。 计算方法 细胞抑制率 =(对照-实验)/(对照-空白)×100% 对照:具有细胞、培养基、CCK-8的孔的OD值 ...
一般情况下建议加入CCK-8试剂的量是培养基体积的1/10。 20.在CCK-8显色过程中,如何终止反应? 有一下几种方法(96孔板): 1、在显色反应后,将培养板放置4℃冰箱内。 2、每孔加10 μl 0.1 M HCL溶液。 3、每孔加10 μl 1%(w/v)的SDS(十二烷基硫酸钠)溶液。注意:反应停止后,应在24小时之内测定。...
不一定要设定。CCK-8试剂在参比波长没有吸光度。设定参比波长的目的是为了取出由于样品混浊所带来的吸收。 15.在CCK-8显色过程中,如何终止反应? 有一下几种方法(96孔板):1、在显色反应后,将培养板放置4℃冰箱内。2、每孔加10μl 0.1 M HCL溶液。3、每孔加10μl 1%(w/v)的SDS(十二烷基硫酸钠)溶液。
1. 与MTT相比,CCK-8和XTT的价格比较贵; 2. CCK-8试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加。 表1:几种细胞增殖/毒性检测方法的比较 普遍认为,CCK-8是操作更简单、数据更稳定、灵敏度也较高的细胞增殖与毒性检测方法。CCK-8实验过程简单总结为配置细胞悬液、加入待测...
4.加入CCK-8:两种方法,每孔直接加入10ul的CCK-8溶液,或者配置成含10%CCK-8溶液的培养基以换液的形式加入,注意加入过程中避免产生气泡,可以将枪头浸入培养液中缓慢加入。 5.加入CCK-8后孵育时间:将加完CCK-8的培养板放入37°C 5%CO2 培养箱中孵育1-4h,CCK-8试剂加入后孵育时间也需要自己摸索,随着时间的增...
WST-8在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色,细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大, 则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系 。 03 操作过程 1. 制作标准曲线 a. 先用细胞计数板,计算细胞数量(计算培养基中的细胞浓度,然后计算细胞),然后接种细胞;...
4)每孔各加入10μl CCK-8溶液,由于加入的CCK-8量比较少,可能会因试剂沾在孔壁上而带来误差,建议在加完试剂后轻轻晃动培养板以帮助混匀,或者直接配置含10%CCK-8的培养基,以换液的形式加入。另外注意,加样的过程中尽量不要产生气泡。5)将培养板放入培养箱中孵育1-4h。因为细胞种类不同,形成的formazan的量也...