小白: CCK-8 检测依赖于脱氢酶催化的反应，所以还原剂会干扰检测，那我该如何确定我的待测溶液是否有还原性呢？小M: 将不含细胞的待测溶液孔中加入 10 μL CCK-8 溶液，孵育 1-4 h 后，测定在 450 nm 处的空白吸光度。若测得的吸光度很小，则说明含有较少的还原剂，正式实验可以直接加入 CCK-8 进行...
CCK8的OD值范围是根据吸光度测量结果来确定的,不同的OD值范围代表着不同的细胞生存状态。 在CCK8实验中,一般来说,OD值在0.1到1之间被认为是正常的细胞生存状态。当细胞的OD值小于0.1时,说明细胞的代谢活性较低,可能存在细胞损伤或死亡的情况。而当细胞的OD值大于1时,说明细胞的代谢活性较高,可能存在细胞过度增殖的...
加入不同浓度的药物或处理因子。加入CCK8试剂：在每个孔中加入适量的CCK8试剂，通常为10μL/孔。孵育：在37°C下孵育1-4小时，具体时间取决于细胞类型和实验要求。检测：使用酶标仪在450nm波长下测量每个孔的吸光度值。
根据这些吸光度值,可以推算出细胞数量。 CCK-8 试剂盒的 OD 值范围受多种因素影响,例如细胞类型、细胞浓度、实验时间等。一般情况下,CCK-8 的 OD 值范围为 0.5-2.0,表示细胞数量在 10^3-10^6 个/ml 之间。但在实际应用中,不同细胞类型的 OD 值范围可能会有所不同。例如,常见的癌细胞系(如 HeLa、A549...
1. CCK8使用前在室温下解冻并离心。 2. 用倒置显微镜检测细胞生长状态,并用4X/10X取生长状态良好,细胞分布及密度均一的孔拍照记录。 3. 在每孔中加入10μL的CCK-8溶液。 4. 在37℃、5% CO2、90%湿度条件下培养0.5-4小时。 5. 用酶标仪在450 nm处测量吸光度。
Ac:对照孔的吸光度(包括细胞、培养基、CCK-8溶液,不含药物); An:空白孔的吸光度(包括培养基、CCK-8溶液,不含细胞和药物)。 注意事项: 1.由于CCK-8的低毒性,CCK-8检测后的细胞可用于其他细胞测定。 2.如果OD值过低,请在加入CCK-8后适当增加细胞数量或延长培养时间。
因此,在进行CCK8实验之前,必须对检测波长的概念进行了解。 步骤三:确定CCK8的最大吸收波长 CCK8最大的吸收波长是450nm。这是由于CCK8产生的显色物在450nm处具有最大的吸收光谱。因此,在进行CCK8实验时,应选择450nm的波长来检测产生的显色物。 步骤四:确定背景光的影响 在进行CCK8实验时,应该考虑背景光对实验...
在96孔细胞培养板中加入10ul CCK-8溶液，37℃下继续孵育0.5-4小时，最后测定吸光度值，建议采用双波长检测，检测波长430-490nm，参比波长600-650nm，或使用450nm单波长检测。CCK-8/MTT应用 两种方法均被广泛应用于细胞增殖、细胞活性测定及药物对体外培养细胞毒性的评估。CKK-8/MTT法对比分析 ...
CCK-8的优势在于它不受酚红或血清的干扰，可通过减去空白吸光度来获得准确数据。 对于大肠杆菌检测，CCK-8的应用需谨慎，以防细菌污染。保存条件方面，建议在0-5℃可保存6个月，-20℃可储存1年。 在实验过程中，需避免培养板边缘孔干燥，空白孔的检测有助于校正误差，使用新鲜培养基进行空白测...