细胞增殖的检测方法众多，CCK-8是细胞增殖检测中的代谢活性检测，属于MTT的升级产品，操作较MTT更便捷（不需要DMSO溶解）。工作原理：CCK-8可以被细胞线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物。颜色的深浅与细胞的增殖成正比，与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450nm波长处测定OD值，间接反映活细胞数量。实...
CCK-8法目前是生命科学研究中检测细胞增殖和毒性应用最广泛的方法之一,截至2022年,在Pubmed数据库中利用CCK-8试剂发表的文献数逐年递增。 实验原理 细胞增殖的检测方法众多,CCK-8是细胞增殖检测中的代谢活性检测,属于MTT的升级产品,操作较MTT更便捷(不需要DMSO溶解)。 工作原理:CCK-8可以被细胞线粒体内的脱氢酶还...
1、将处理过的细胞胰酶消化后计数,接种1000个细胞至96孔板,每孔100μl培养基,将培养板置37℃,5%CO₂培养箱中培养0 h、24h、48h和72h;2、每孔加入10μlCCK-8溶液,用加了相应量细胞培养液和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照;3、在细胞培养箱内继续孵育0.5h,用酶标仪在450nm测定吸光度。 细胞增...
2.在96孔板中接种细胞悬液 (100 μL/孔) :按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做5-7个细胞浓度梯度(比如,稀释10倍,100倍...),每组4-6个复孔。 3.绘制标准曲线:接种后培养一定时间待细胞贴壁后,然后每100μL培养基加10μL(10%)CCK-8试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量...
1、CCK-8基本概念 CCK-8: (Cell Counting Kit-8),是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂。 基本原理:CCK-8试剂中含有WST-8,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物,生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。细...
CCK8全称Cell Counting Kit-8试剂,该试剂中含有水溶性的四唑盐WST-8,它在电子载体1-Methoxy PMS的作用下被细胞线粒体内的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物,甲瓒产物生成的数量与活细胞的数量成正比,利用酶联免疫检测其在450nm波长处测定其吸光度值,可间接反应活细胞数量。因此可利用这一特性直接进行细胞...
CCK-8是一种高灵敏度、无放射性的比色检测法,用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数量,可替代传统的MTT法,常应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。尽管有人戏称CCK-8测细胞增殖实验只要有试剂盒就“有手就行”,但实际操作中仍有许多细节需要注意。本期细胞学堂将详细介绍CCK-8法的原理、...
Cell Counting Kit-8,简称CCK-8试剂盒或CCK8试剂盒,是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒,可用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。
CCK-8(Cell Counting Kit-8)法是一种常用的细胞增殖和毒性检测方法，其实验步骤可以归纳为以下几点：一、实验准备 细胞准备：选择生长状态良好的细胞，进行常规胰酶消化后，离心收集细胞沉淀，并用含血清培养基重悬，制成单细胞悬液。细胞数量根据实验需求调整，对于细胞增殖实验，每孔可加入2×10³个细胞;对于细胞...
1.孔板最外圈试剂容易挥发，建议最外一圈的孔只加培养基，不作为测定孔用。可以使用NEST的 Edge96孔板避免。2.CCK-8沾壁，建议加入CCK-8后，轻轻敲击培养板以帮助混匀。3.细胞数量过多或过少，建议预先在1000-100000个/孔范围内摸索条件。4.孔内气泡干扰酶标仪检测，检测前需确保每个孔内无气泡。Q：在做细胞...