至此我们可以总结为GSDME可以诱导细胞焦亡,当被caspase-3生理性切割的时候,仅有肿瘤坏死因子诱导是不会发生细胞焦亡。 第二,验证GSDME只能被caspase-3所切割,1, 4, 6, 7, 8, 和9切割不了,突变型不能切割GSDME。而且其切割位点在Asp-270。这就验证了肿瘤坏死因子诱导细胞凋亡向细胞焦亡的转变,需要Caspase-3切割...
Caspase-3抗体(兔多抗)用人工合成的人Caspase-3本身的切割位点处一段多肽，经适当修饰后免疫兔子，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度多克隆抗体。Caspase-3抗体可以识别全长的Caspase-3(35kD)，也可以识别Caspase-3被剪切后产生的17kD片段。未发现和其它Caspase家族蛋白有交叉反应。Caspase-3...
D664是caspase倾向的切割位点,而通过选择性抑制实验,作者发现caspase-3/8在其中具有最重要的作用。他们在C99ΔC诱导的突触损伤实验中尝试通过caspase-3荧光染料抑制剂(FLICA)的方式,鉴定了caspase-3的出现位置与活性的发生的时间尺度。结果显示,caspase-...
从分子水平研究揭示Caspase-3能够直接切割自噬调控因子ULK1D458位点,Caspase-3的缺失能够促进ULK1蛋白激酶的上调,从而促进白血病细胞自噬。白血病中蛋白水解酶Caspase-3,一方面通过水解ULK1蛋白激酶,另一方面也可以通过mTOR/P70S6K/4EBP1信号通路,抑制细胞自噬发生。研究证明Caspase-3及其调控的细胞自噬信号通路与白血病发生紧...
第一,与GSDMDDEVD类似的是,GSDME在TNFαc诱导下被切割成2个片段,并且同时被 caspase-3/7所激活。而且GSDME所致的焦亡与药物抑制和敲除caspase-3相关。 然而在CASP3-/-都敲除的细胞中虽然还存在着由caspase-7诱导的细胞凋亡,但是GSDME却没有被切割。课题组验证了以下几个caspase-3可能的切割位点, 人GSDME 267 DM...
GSDME的铰链区含有一个caspase3的特异性切割位点,当caspase3被激活后,能够高效地切割GSDME。切割后的GSDME释放出其N端蛋白的细胞膜打孔活性,导致细胞膜通透性增加和细胞内容物的释放,从而引发细胞焦亡。化疗药物通过激活凋亡信号通路并触发caspase3的激活,进而切割GSDME并引发细胞焦亡。这一过程揭示了化疗药物在诱导肿瘤...
从分子水平研究揭示Caspase-3能够直接切割自噬调控因子ULK1D458位点,Caspase-3的缺失能够促进ULK1蛋白激酶的上调,从而促进白血病细胞自噬。白血病中蛋白水解酶Caspase-3,一方面通过水解ULK1蛋白激酶,另一方面也可以通过mTOR/P70S6K/4EBP1信号通路,抑制细胞自噬发生。王兰研究组通过与迈阿密大学肿瘤研究中心教授Stephen Nimer...
从分子水平研究揭示Caspase-3能够直接切割自噬调控因子ULK1D458位点,Caspase-3的缺失能够促进ULK1蛋白激酶的上调,从而促进白血病细胞自噬。白血病中蛋白水解酶Caspase-3,一方面通过水解ULK1蛋白激酶,另一方面也可以通过mTOR/P70S6K/4EBP1信号通路,抑制细胞自噬发生。王兰研究组通过与迈阿密大学研究中心教授Stephen Nimer合作,...
Caspase-3抗体(兔多抗)用人工合成的人Caspase-3本身的切割位点处一段多肽,经适当修饰后免疫兔子,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度多克隆抗体。Caspase-3抗体可以识别全长的Caspase-3(35kD),也可以识别Caspase-3被剪切后产生的17kD片段。未发现和其它Caspase家族蛋白有交叉反应。Caspase-3是...
原理:将萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)的N末端和peptide A (pepA) 融合,将C末端和peptide B (pepB)融合,中间用caspase-3的切割位点DEVD分隔开。需要注意的是,pepA可以和pepB互作。 正常情况下,这个PepA-N-Luc-DEVD-PepB-C-Luc融合蛋白没有荧光素酶活性。当caspase-3激活的时候,切割掉DEVD间隔序列,这...