这篇综述旨在展示使用不同类型的检测方法来检测CAR-T或T细胞活化和杀伤靶肿瘤细胞的效果。CD19特异性CAR-T治疗，Kymriah®和Yescarta®分别治疗急性淋巴细胞白血病（ALL）和非霍奇金淋巴瘤，为临床中具有更多CAR-T靶点的其他CAR-T治疗打开了大门。到目前为止，主要成功的药物是靶向血液恶性肿瘤。它比实体肿瘤更容易...
这篇综述旨在展示使用不同类型的检测方法来检测CAR-T或T细胞活化和杀伤靶肿瘤细胞的效果。 CD19特异性CAR-T治疗,Kymriah®和Yescarta®分别治疗急性淋巴细胞白血病(ALL)和非霍奇金淋巴瘤,为临床中具有更多CAR-T靶点的其他CAR-T治疗打开了大门。到目前为止,主要成功的药物是靶向血液恶性肿瘤。它比实体肿瘤更容易靶向...
评估CAR-T细胞功能最相关的功能检测是验证其靶肿瘤细胞的细胞毒性。一般使用共培养试验进行检测,其中CAR-T细胞与呈递抗原的肿瘤细胞一起培养,并对存活的肿瘤细胞数量进行定量。一般可以在肿瘤细胞中添加一个报告基因(如,eGFP--绿色荧光蛋白),这样就可以通过荧光来进行定量检测了。另外,也可以让肿瘤特异性表达萤火虫荧光素...
二、CAR-T杀伤功能检测 除了使用细胞因子的释放来测量CAR-T细胞的活性外,对靶向肿瘤细胞群中特异性细胞裂解的检测也显示了CAR-T细胞的杀伤活性。DELFIA EuTDA细胞毒性试剂安全、快速的用BATDA试剂标记靶细胞,一旦进入细胞,内酯酶裂解BATDA底物形成TDA,不能再穿过细胞膜屏障。标记靶细胞的裂解释放上清液中的TDA,然后将...
CAR-T 细胞质量检测之流式抗体 流式细胞术作为一种在功能水平上对单细胞进行定量分析和分选的检测手段,可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好等诸多优势,是判断 CAR-T 细胞活性和组分的一种重要方式。如全球首个获得 FDA 批准上市的 Kymriah 作为一款基于基因改...
二、CAR-T杀伤功能检测 除了使用细胞因子的释放来测量CAR-T细胞的活性外,对靶向肿瘤细胞群中特异性细胞裂解的检测也显示了CAR-T细胞的杀伤活性。DELFIA EuTDA细胞毒性试剂安全、快速的用BATDA试剂标记靶细胞,一旦进入细胞,内酯酶裂解BATDA底物形成TDA,不能再穿过细胞膜屏障。标记靶细胞的裂解释放上清液中的TDA,然后将其...
流式方法分析的灵敏度包括最低检测限LOD也就是指信号值与背景值得区分能力,本研究中根据 15 份不含 CAR19 T 细胞的 外周血样本的 FCM 检测结果计算出 LOD(即平均值加三倍 SD 值)。最终检测出平均值为0.016%,而SD为0.00696%,因此LOD最终为0.03678%(图2B)。
例如,研究人员可以将CAR-T细胞与表达相应抗原的肿瘤细胞共培养,通过检测肿瘤细胞的存活率或CAR-T细胞释放的特定细胞因子(如IFN-γ)来评估CAR-T细胞的活性。 5. 免疫表型分析 通过分析CAR-T细胞的免疫表型,研究人员可以评估CAR基因转导对T细胞功能的影响。这包括检测T细胞表面标志物的表达,如CD4、CD8、CD25、CD127等,...
CAR-T,全称Chimeric Antigen Receptor T-Cell,即嵌合抗原受体T细胞免疫疗法。简单来说,给患者自身T细胞进行基因工程修饰,加上嵌合抗原受体(CAR),经过修饰的T细胞识别并攻击带有特定抗原的肿瘤细胞,激活机体自身免疫反应从而达到抗肿瘤效果。 CAR的基础设计中包括一...
CAR-T药物的质量在批次和患者间存在差异,因此对CAR-T药物的质量和功能进行表征至关重要。细胞因子释放检测是CAR-T细胞功能检测的重要环节。除此之外,不容忽视的是CAR-T生产工艺过程中引入的杂质检测,如细胞因子残留检测。细胞因子ELISA检测试剂盒可以通过检测代表性细胞因子的表达来评估CAR-T细胞对靶细胞的杀伤活性和...