Artursson 等用Caco-2 细胞模型研究了多种不同结构化合物的转运机制,发现Papp值均在5×10-8 ~5×10-5 cm/s 之间,经过与体内研究结果比较发现,吸收率在1% - 100%间的物质,其Papp在0. 1~1×10-6 cm/s 之间; 完全吸收物质的Papp一般大于10-4 cm/s,而吸收<1%的物质,其Papp一般低于10-7 cm/s。还...
1、细胞损伤:Caco-2细胞出现损伤或死亡,导致模型中细胞的数量或完整性下降。这是由于培养条件问题、细胞培养液变质、细菌或真菌感染等因素引起的。2、胞间连接的改变:Caco-2细胞模型的电阻值主要由细胞间的紧密连接决定。紧密连接的结构或功能发生改变,电阻值下降。这与细胞培养条件、细胞分化状态、细胞...
与人类小肠(50-100Ω/ cm2)2相比,Caco-2模型的跨上皮电阻(TEER)值通常高出一个数量级(1400-2000Ω/ cm2)。此外,Caco-2模型未能再现小肠的细胞多样性,仅表现为上皮成分。 近年来,人们一直在努力改进临床前药物开发和疾病研究中使用的体外模型,尤其是微生理系统(MPS),也称为芯片上的器官(OOC)的使用越来越广...
选择生长状态良好的同代Caco-2细胞接板培养,使用血球计数板记录细胞数量,分别比较体积分数为10%、15%、20%血清的DMEM低糖培养基和RPMI1640培养基对细胞生长的影响。 1.3.3Caco-2细胞吸收模型的评估 1.3.3.1 Caco-2细胞单层致密性测定 细胞单层跨膜电阻(trans...
Caco-2细胞(人类结肠腺癌)单层培养是一个公认的行业标准的体外模型,用于预测药物通过肠屏障的渗透性。但也存在公认的局限性。与人类小肠(50-100Ω/ cm2)相比,Caco-2模型的跨上皮电阻(TEER)值通常高出一个数量级(1400-2000Ω/ cm2)。此外,Caco-2模型未能再现小肠的细胞多样性,仅表现为上皮成分。
你的Caco-2 在什么里面养了21天? 我也在养,我的电阻测定值大概也就是120-130欧,减去空白值乘以面积,都只是>200点点,根本不可能有文献说的500多,不过文献标准说了200-500就算完整了。 我用的是transwell,应该不用涂胶的吧,你用的是什么? 首先,你的细胞是多少代的?40-50代后的细胞不好长,或者说不容易有...
试验首先构建Caco-2体外细胞模型,将Caco-2细胞接种于Transwell细胞转运培养槽的聚碳酸酯微孔滤膜上,在37℃C和5%CO2浓度培养条件下培养21d,细胞跨膜电阻值达到659Ω·cm2,肠腔侧(AP)碱性磷酸酶活性显著高于基底侧(BL)酶活性(P<0.01)。表明构建的Caco-2细胞模型在形态上与小肠上皮细胞相似,细胞已产生极性,且细胞...
细胞培养:首先,需要将Caco-2细胞培养在多孔透明的培养膜上,通常需要14~28天,以形成一个细胞单层。在此过程中,要确保Caco-2细胞达到一定的分化程度,以更好地模拟肠上皮细胞层。前处理:选择符合转运条件的细胞孔(如电阻值大于300 Ω•cm²),用预热的HBSS缓冲液(或其他适当的缓冲液)清洗细胞2~3遍,...
方法:Caco-2 细胞接种于Transwell 24 孔微孔滤膜培养板上,培养3,6,9,12,15,18,21 d,通过观察细胞形态、绘制生长曲线、测定跨膜电阻值( TEER) ,比较低、中、高细胞浓度( 5×104,1×105,2×105·mL-1) 对细胞单层完整性的影响,以确定细胞接种密度和培养时间; 通过测定荧光黄的跨膜通透性、细胞膜顶侧( ...
1. TEER值的计算TEER(Ω·cm2)=[测得电阻值-空白小室(未接触细胞的小室,电阻在100~150Ω)电阻值]x0.6cm2(聚碳酸酯多孔膜面积) Caco-2细胞单层TEER值随培养天数递增,15天后渐趋平缓,21天后可达200~600Ω·cm2。MDCK Ⅱ细胞培养3~5天,TEER值可达到l00Ω·cm2以上。