1. 采用MEM完全培养液(含10%胎牛血清、1% NEAA、1%双抗)在37℃和5%CO2条件下培养Caco-2细胞; 2. 每隔一天换一次培养液。当细胞汇合程度达80%时,进行细胞传代。不允许细胞过度汇合(>90%),否则会影响随后Caco-2单层细胞的形成。将细胞培养液吸出,用PBS清洗2次,加入0...
Caco-2细胞系来源于人的直肠癌,其结构和生化作用类似于人小肠上皮细胞,含有与小肠刷状缘上皮相关的酶系,与正常的成熟小肠上皮细胞在体外培育过程中出现逆向分化不同,Caco-2细胞在传统的细胞培养条件下,生长在多空的可渗透的聚碳酸酯膜上可达到融合并自发分化为肠上皮细胞,形成连续的单层。培育21天以后,形成致密的...
Caco-2细胞(人类结肠腺癌)单层培养是一个公认的行业标准的体外模型,用于预测药物通过肠屏障的渗透性1。药物渗透性在临床前药物研究中确定,是开发新疗法时的一个重要参数,因为它对达到系统循环的口服药物的量有影响。标准Caco-2模型由接种在静态培养皿中的多孔Transwell膜上的单层细胞组成,该膜将两个流体腔室(顶部和...
Caco-2细胞研究的最常见方式之一是细胞渗透性试验,通过测量穿过极化Caco-2细胞单层的化合物流量来预测体内药物吸收,模拟肠上皮屏障以及体内肠转运情况。 从而进行相关药物研发;此外,当在特定条件下培养时,细胞可发生分化和极化,转为类似于排列在小肠中的肠细胞,在细胞结构和功能上有许多相似性,如:具有肠上皮细胞样...
2细胞单层膜形成培养方法(57)摘要本发明提出了一种Caco‑2细胞单层膜形成培养方法:用含20%胎牛血清、1%青霉素/链霉素的MEM培养基培养Caco‑2细胞,当细胞汇合度达到60%‑70%时胰酶消化,连续传代培养2‑3次,待细胞培养到对数生长期,过量接种细胞培养,细胞贴壁展开后,用PBS清洗未贴壁细胞,即得到Caco‑2单层...
2. 细胞接种与培养 细胞接种: 准备细胞悬液:在培养瓶中收集Caco-2细胞,使用胰蛋白酶处理后重悬于培养基中。 接种:将细胞悬液接种在Transwell® 24孔板的上室中,细胞密度通常为1 × 10⁵ - 1 × 10⁶细胞/孔。 培养: 培养:在37°C、5% CO₂的培养箱中培养,直到细胞在滤膜上形成完整的单层(一般需...
一、Caco2细胞单层模型的建立1.细胞培养Caco2细胞是一种人类结肠癌细胞系,具有分化为肠道上皮细胞的能力。将Caco2细胞培养在含有10%胎牛血清的DMEM培养基中,置于37℃、5%CO2的培养箱中。待细胞长满瓶底后,进行传代培养。2.细胞接种将Caco2细胞以适当的密度接种于Transwell培养板中,培养板底部为多孔膜,孔径为0.4...
通过分化Caco-2细胞模型预测营养物质的生物利用度时,结果容易受到许多因素影响,如受试物的理化性质,单层的面积,pH梯度以及与培养设备的特异性结合,这可能会导致体内体外结果不一致。通过在上室或下室添加油酸、牛黄胆酸、DMSO、丙二醇和乙...
2018. 20. 106 近年来,研究药物在细胞层面的活动情况,比较常用的工具是 Caco-2 细胞模型 [1-2] 。 Caco-2 细胞培养成熟后与人体小肠的上皮细胞相似 [2] 。 本研究中,将 Caco-2 细胞接种于 Tran-swell TM 小室中,建立 Caco-2 细胞单层模型,可用于研究中枢神经系统药物与 P-gp 底物跨膜转运的相互影响...