BL21(DE3)菌株表达蛋白的原理主要基于T7启动子调控目的基因的表达。这种菌株经过改造,含有lacl基因、受lacUV5启动子控制的T7 RNA聚合酶基因以及一小部分lacZ基因。lac基因被插入到int基因中,使其失活,防止在缺乏辅助噬菌体的情况下发生噬菌体切割。 当BL21(DE3)菌株被加入IPTG等诱导剂后,T7 RNA聚合酶被诱导表达。
BL21 (DE3) pLysS菌株携带质粒pLysS,具有氯霉素抗性。pLysS含有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能够作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌,从而能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达。适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶)。
过量表达HIV-T AT m-Survivin (T34A) , 从而导致生长细胞生存压力显著增加, 难以长成菌落, 最终使得活菌落数显著减少; 使用带有T7溶菌酶质粒的BL21(DE3) pLysS作为宿主细胞时, 虽然本底表达可以控制得更加严谨, 但由于0. 5mmol/L IPTG的加入, 在细胞生长初期T 7启动子就已高效开启, 该宿主细胞的生存状况和...
BL21(DE3)pLysS 感受态细胞是大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。 特点 该菌株带有质粒pLysS,具有氯霉素抗性。此质粒含有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达。该菌株适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达 ...
产品及特点BL21(DE3)pLySs来源于BL21(DE3),带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。能够利用IPTG直接进行蛋白的诱导表达。含有的pLySs质粒能够产生T7溶菌酶,可有效降低目的基因基础表达水平。 BL21(DE3)plysS菌种(BL21(DE3)plysS E.coli Strain)低温运输,-80℃保存,有效期...
BL21(DE3)PLysS感受态细胞: BL21(DE3)PLysS菌株携带pLysS,具有「氯霉素」抗性,可以表达能抑制T7 RNA聚合酶的T7溶菌酶(T7lysozyme),从而可以抑制T7 RNA聚合酶在目的蛋白被IPTG诱导前的本底表达,即导致本底性的外源重组蛋白的表达被有效抑制.这种情况下特别适合于影响细胞生存和活力的外源毒性蛋白的表达.BL21(DE3) PL...
由于BL21 Star(DE3)菌株的异源基因基础表达水平较高，所以不适合毒性蛋白的表达。BL21 Star(DE3)pLysS菌株携带pLysS质粒，具有氯霉素抗性。pLysS含有表达T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌，还可与T7 RNA聚合酶结合抑制其转录活性，进而降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG...
一、BL21(DE3)pLysS细胞的特点 BL21(DE3)pLysS细胞是一种缺失棘突病毒抗性基因(lysozyme) 的感受态大肠杆菌细胞系。该细胞系具有以下特点: 1.能够高效表达外源蛋白,产量较高,适用于大规模蛋白质表达。 2.具备感受态特性,能有效产生T7RNA聚合酶,并且对T7启动 ...
该菌株带有质粒plysS,具有氯霉素抗性。此质粒含有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达。适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。 抗生素耐药性: 细胞具有氯霉素抗性。 使用方法:提示:1、感受态细胞应保存在-70℃,不可多次冻融和放置时间过长,以避免降低感受态细胞的转化效率...
使用BL21、BL21(DE3)等菌株时,有时会出现菌体生长抑制的现象,无法实现大肠杆菌的高密度发酵。造成这种现象的可能原因是目的蛋白存在本底泄露,且具有细胞毒性,抑制了大肠杆菌的生长。 今天菌菌继续分享大肠杆菌(E.coli)表达宿主相关的实用技术——适用于毒性蛋白表达的宿主菌:BL21 AI、BL21 (DE3) pLysS、BL21 (DE3)...