然后迅速取材,将样品修成1mm×1mm×5mm大小,投入1%锇酸溶液中固定1小时,用1/15M磷酸缓冲液(pH7.4)清洗两次,每次10分钟。 2) 二甲基亚砜浸泡:将样品依次放入25%、50%二甲基亚砜溶液中,各浸泡30分钟。 3) 割断:用TF—1型冷冻割断装置进行割断。然后将割断后的样品放到50%二甲基亚砜中,等融化后再用1/15M磷酸...
③滴加1%锇酸水溶液足量覆盖切片,放在有盖暗湿盒内,置微波5档5m in ,拿出在室温复温5m in 后蒸馏水洗3次;④酒精梯度脱水、透明、树胶封固。二、结果:脂肪黑色,其它组织黄褐色。三、讨论:1.脂肪染色主要用于显示脂肪肉瘤、组织脏器的脂肪变性和类脂质的异常沉着的诊断及鉴别诊断。常用脂溶性染料,如苏丹 、苏丹...
五、透射电子显微镜下观察脂滴沉积、线粒体形态、自噬体结构 胰酶消化细胞,PBS洗涤,1 500 r/min(离心半径为14 cm)离心5 min,弃上清液,加入1 mL 2.5%戊二醛溶液固定过夜,PBS清洗。1%锇酸溶液4 ℃固定2 h,PBS清洗,分别用50%、70%、...
(2)待标记蛋白质和金溶液的准备,同前。注意点是用0.2mol/l K2CO3将金溶液pH调至5.9～6.2之间。 (3)确定胶体金与蛋白A的结合用量比例。取一系列盛有0.1ml胶体金液的小玻璃管,分别加入不同量的蛋白A,5min后,再各加 0.25ml 10%的NaCl.如加入的蛋白A浓度不够,不能稳住金粒,在电解质NaCl的影响下,金粒聚...
8)脱糖:上述步骤鉴定到有vlps存在的组分混合后,用3倍tne溶液进行稀释,稀释后加入超速离心管进行超速离心,30000rpm,离心2h,离心后的沉淀用适量体积的tne重悬,重悬后的溶液即为纯化bvdv-vlps溶液,即为纯化牛病毒性腹泻病毒1型病毒样颗粒。 由上述方法制备得到的牛病毒性腹泻病毒1型病毒样颗粒也是本发明保护的范围。
锇酸是一种化学物质,化学式为OsO₄,分子量为303.23。它是一种无色或略带浅蓝色的结晶,具有吸湿性。锇酸在酸性溶液中较为稳定,但在碱性溶液中会迅速分解。锇酸的熔点为40℃,沸点为130℃,在常温下为固体。 二、锇酸的应用 锇酸主要用于制备锇的其他化合物,如锇的卤化物、氧化物等。此外,...
(12)1%锇酸(0.1mol/l PBS溶液)1h. (13)双蒸水洗15min. (14)系列酒精或丙酮脱水,包埋、超薄切片。(15)枸椽酸铅对照染色。 为增加抗非特异性染色,有的实验室倾向在TBS中加入1%小牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA, Sigma)。理想的免疫金染色切片,背景应清洁,无残留的金或其他无机盐颗粒,金粒集中在...
单纯组织固定液易燃易爆,一般应配成饱和溶液储藏的是( )。 A、甲醛 B、重铬酸钾 C、锇酸 D、苦味酸 E、铬酸 免费查看参考答案及解析 题目: 用锇酸固定液固定组织时,其特点是( )。 A、延长固定时间,组织的脆性增加,对染色有利 B、缩短固定时间,组织的脆性增加,对染色有利 C、延长固定时间,组织的脆性增加,...
6.四氧化锇(OsO4锇酸):常用PBS配制1%锇酸溶液后固定1h,用于免疫组化及电镜观察。有强烈刺激,需在通风橱内操作。(三)组织旳脱水、浸蜡、包埋和切片前三步只用于石蜡切片,冰冻切片和振动切片不需此环节。切片可分为:石蜡切片:脱水、透明、浸蜡、包埋、切片5~7μm;冰冻切片:浸糖,20%~30%蔗糖4oC过夜,降低...
2mm的片段放置于2.5%的戊二醛溶液中进行固定。 [0062] ② 二次固定:将用戊二醛固定的叶片用磷酸缓冲液(0.1m、ph=7)冲洗3次后,用1%锇酸浸没过夜处理。 [0063] ③ 脱水:将二次固定的的叶片用磷酸缓冲液冲洗3次,接着用50%、70%和90%梯度浓度的乙醇进行脱水,每次脱水15min,脱水后将样品转入丙酮乙醇等比例混合...