本实验主要采用了724型酸性阳离子树脂交换吸附,(NH4)2SO4盐析、ph调节等电点去除杂蛋白,凝胶层吸分离纯化,最后用SDS-PAGE鉴定纯化产物等方法。 1.1 溶菌酶的制备 以蛋清为原料制备溶菌酶,采用树脂吸附法提取溶菌酶。因溶菌酶为碱性蛋白,在近中性环境中被阳离子交换树脂所吸附。利用该性质,可将它与鸡蛋中其他蛋白分...
为了从鸡蛋清中提取并提纯得到的溶菌酶,我们分别采用了等电点沉淀法得到了溶菌酶粗品,然后通过离子交换层析提纯得到的样品,最后测定了所制的溶菌酶活性及蛋白质含量。 【实验部分】 1.1 试剂与仪器 1.1.1 试剂 250mL烧杯、玻璃棒、小漏斗、定性快速滤纸、50mL量筒、50mL离心管、鸡蛋1只、0.02mo1/LPBS(pH7.0、 ...
溶菌酶的提取,分离纯化,产物纯度鉴定及活性测定 实验目的: 1、学习和掌握溶菌酶的制备过程 2、学习和掌握溶菌酶的纯化过程 3、学习和掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳的德原理和技术 4、测定溶菌酶的分子量和所提取的溶菌酶的浓度 5、测定所提取的溶菌酶的活性 试验原理: 溶菌酶(lysozyme)又称胞壁质酶(muramidase)或N-...
1. 溶菌酶的粗提取 2. 溶菌酶的分离纯化及酶活力、蛋白浓度测定 3. 溶菌酶纯度鉴定与分子量测定 2 背景知识 溶菌酶(lysozyme):胞壁质酶(muramidase)或N-乙酰胞壁质 聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohydrlase),是一种能水 解致病菌中黏多糖的碱性酶。 生物学效应:主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸...