方法一:直接加0.5ul Taq,70度,10min 即可,但是这种方法效率较低,但是简单,快速。方法二:PCR产物,切胶回收,浓缩后加10*PCR buffer 1ul, dATP (2mM) 1ul, Taq 0.5ul, 加水至补充体积至10ul,70度 20-30min即可。
高保真酶P的产物如果不用加A试剂盒的情况下如何加A,或者平末端能直接连T载体吗?求大神指点 ...
在PCR反应程序快结束时加Taq酶于72度反应5-10分钟即可.近期我是用NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒。...
妹子化学本科转生物研究生,小白一个,刚入小木虫,木有存货,全献给大神们了。我的Forward引物和Reverse引物5'端都是A,用Q5高保真酶进行PCR后需要将产物通过T4链接酶链接到pGEM载体上,请问还需要额外加A尾吗?
2012-09-17 23:31:45 PCR产物回收后再用Taq酶于72度反应5-10分钟即可(包括buffer及dNTP)正解!
跟你正常的PCR反应体系一样,模板就用全部的回收产物,不加引物,其它都一样,另外建议加A后最好过柱...
PCR产物回收后再用Taq酶于72度反应5-10分钟即可(包括buffer及dNTP)能不能说详细些,各加多少的量,...
用高保真的Taq酶也行,但是看说明书也有说为了提高连接效率,可以纯化再加A尾,再连,这样和高保真一样...