镍柱亲和层析的原理基于金属离子和蛋白质之间的配位作用。其主要步骤如下:-第一步:将镍离子通过某种方法固定在层析树脂上,形成镍柱。-第二步:将含有目标蛋白质的混合物(如细胞裂解液)加入镍柱。-第三步:目标蛋白质中的组氨酸残基与镍离子发生配位作用,与镍柱发生结合。-第四步:通过洗脱步骤,将非特异结合的蛋白质洗...
镍柱亲和层析 亲和层析的原理:利用分子间存在特异性的相互作用,它们之间都能够进行专一而 又可逆的结合,这种结合力就称为亲和力。 常见具有专一性亲和力的生物分子对: 酶: 基质类似物,抑制剂,辅酶 抗体: 抗原,病毒,细胞 细胞: 细胞表面特异蛋白,外源凝集素 核酸: 互补碱基序列,组蛋白,核酸聚合酶 激素或药物: ...
此外,镍柱亲和层析还可以用于从复杂生物样品中分离和富集低丰度蛋白质,提高蛋白质鉴定的准确性和灵敏度。 总之,镍柱亲和层析纯化柱仪器是一种高效、特异的蛋白质纯化工具,在生物科学研究领域发挥着重要作用。通过深入了解其工作原理和使用方法,我们可以更好地利用这一技术来满足科研和...
His-Tag 是重组蛋白纯化最为常见的标签,其原理是将Ni2+螯合配体固定在层析介质上,组氨酸(His)带有一个咪唑基团,该基团能够与 Ni2+形成配位键并选择性结合,而不带有 His 残基的蛋白不能与 Ni2+形成配位键并结合,这样便能有效地将目的蛋白(具有 His-Tag 的蛋白)与非目的...
1、镍柱亲和色谱亲和层析的原理:利用分子间的特定相互作用,它们可以特异性地可逆结合,这种结合力称为亲和力。具有特定亲和力的普通生物分子对:酶:基质类似物、抑制剂、辅酶抗体:抗原、病毒、细胞细胞:细胞表面特异性蛋白,凝集素核酸:互补碱基序列,组蛋白,核酸聚合酶激素或药物:受体,载体蛋白外源凝集素:多糖、糖蛋白、...