RPA等温扩增技术依赖多种酶与蛋白的参与。RPA的反应过程中,首先重组酶蛋白与引物形成复合物(A),并在双链DNA中寻找同源序列(B)。然后通过重组酶的链置换活性将引物插入同源位点(C),并且单链结合蛋白稳定置换DNA链(D)。随后重组酶被分解,使得引物的3'末端被链置换并与聚合酶结合(E),使其延长引物(F),通过循环重...
目前有许多种等温核酸扩增技术,包括环介导等温扩增(LAMP)、滚环扩增(RCA)、多重置换扩增 / 全基因组扩增(MDA-WGA)、基于核酸序列的扩增 (NASBA)、转录介导的扩增(TMA)等、重组酶聚合酶扩增 (RPA)等。等温扩增技术的逐渐广泛使用推动了分子诊断试剂...
RPA等温扩增技术原理 RPA等温扩增技术依赖多种酶与蛋白的参与。RPA的反应过程中,首先重组酶蛋白与引物形成复合物(A),并在双链DNA中寻找同源序列(B)。然后通过重组酶的链置换活性将引物插入同源位点(C),并且单链结合蛋白稳定置换DNA链(D)。随后重组酶被分解,使得引物的3'末端被链置换并与聚合酶结合(E),使其延长...
重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)是等温核酸扩增技术之一。RPA技术由英国TwistDx公司于2006年首次推出。其开发的初衷是为了提供一种快速、简便、灵敏的核酸扩增方法,以弥补PCR技术在复杂设备和时间消耗上的不足。 RPA技术的核心在于利用多个重组酶、单链结合蛋白和链置换DNA聚合酶在恒温条件下...
我国科研人员开发了常温下快速检测新冠病毒的新型PCR技术,称为逆转录重组酶聚合酶扩增(RTRPA)技术,原理见下图。重组酶与引物结合,使模板DNA无需变性即可与引物结合。子链延伸的过程中,被置换出的非模板链与单链结合蛋白暂时结合。下列关于RTRPA的叙述错误的是( )...
RPA技术原理 重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)是等温核酸扩增技术之一。RPA技术由英国TwistDx公司于2006年首次推出。其开发的初衷是为了提供一种快速、简便、灵敏的核酸扩增方法,以弥补PCR技术在复杂设备和时间消耗上的不足。 RPA技术的核心在于利用多个重组酶、单链结合蛋白和链置换DNA聚合酶...
RPA抗干扰能力强，检测结果可与PCR高度一致。此外，RPA可以在37-42°C下运行，无需复杂的温度控制设备，非常适合资源匮乏环境下的现场检测，并可以在20 min内得到检测结果，有利于样品的大规模筛选和快速检测。2. 反应机理 重组酶聚合酶扩增技术通过模拟DNA体内扩增，在等温条件下产生目的片段。该技术主要依赖重组酶、...
重组酶聚合酶扩增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA）是一种新型核酸恒温扩增技术，可以在37~42 ℃条件下，10~30 min内实现待测靶标的快速检测。它具有反应灵敏度高、特异性强、对仪器依赖程度低且可整合多种检测模式等优点，特别适用于基层和现场即时检测，可广泛应用于体外诊断、动物疫病、食品安全、生物...
重组酶聚合酶扩增(RPA)技术是一种新型核酸恒温扩增检测技术。该技术可以在37~42 ℃条件下实现待测靶标的快速检测。它具有反应灵敏度高、特异性强、对仪器依赖程度低且可整合多种检测模式等优点,特别适用于基层和现场即时检测。本文从RPA技术...