我国科研人员开发了常温下快速检测新冠病毒的新型PCR技术,称为逆转录重组酶聚合酶扩增(RTRPA)技术,原理见下图。重组酶与引物结合,使模板DNA无需变性即可与引物结合。子链延伸的过程中,被置换出的非模板链与单链结合蛋白暂时结合。下列关于RTRPA的叙述错误的是( )...
实现RPA反应体系的持久混合除可以使用Twist DXTM公司配套的仪器外,也可以借助电润湿芯片实现,相对于常规RPA反应,该方法可极大提高反应性能[9]。 抑制剂:RPA反应对各种抑制剂的耐受程度优于PCR反应[10],但检测样本中的背景DNA过高也会干扰RPA...
RPA/RAA重组酶聚合酶扩增技术原理:RPA等温扩增技术依赖多种酶与蛋白的参与,主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。RPA的反应过程中,首先重组酶蛋白与引物形成复合物(A),并在双链DNA中寻找同源序列(B)。然后通过重组酶的链置换活性将引物插入同源位点(C...
LAMP:环介导等温扩增法的特征是针对目标DNA链上的六个区段设计四个不同的引物然后再利用链置换反应在一定温度下进行反应。反应只需要把基因模板、引物、链置换型DNA合成酶、基质等共同置于一定温度下(60～65℃)、经一个步骤即可完成。 RPA:主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋...
重组酶聚合酶扩增(RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,*反应温度在37℃左右。重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物定位了...
反应温度为RPA中的酶提供了合适的工作环境，而搅拌则可以增加均质溶液反应中RPA组分之间的相互作用。建议...
RPA技术的原理是基于同源重组原理,依赖于专一性的重组酶和DNA结合蛋白,实现引物与靶序列的结合和合成新的DNA链。这种技术可以在短时间内完成核酸扩增,且具有高敏感性和特异性,能够在复杂的样品中准确检测目标DNA。 RPA技术的原理简单而高效,为快速检测创伤弧菌提供了新的可能。通过结合RPA技术与其他技术的优势,可以更...
1、反应原理 RPA 技术的整个反应体系包含噬菌体重组酶 UvsX 及其辅助因子 UvsY、寡苷酸引物、单链核 酸结合蛋白(SSB)、DNA 聚合酶,DNA 模板、ddH 2 O 和 Mg2+等。 其扩增原理是恒温条件下,重组酶与长约 30～35 nt 的寡核苷酸引物结合形成复合物,并在双链 DNA 模板中寻找靶位点,重组 酶打开双链 DNA,引...
RPA、RAA和ERA反应原理 RPA技术在2006年被首次提出,其通过重组酶、重组酶加载因子和单链结合蛋白与引物和靶序列的相互作用,完成核酸靶序列的体外扩增。具体反应流程为:T4 UvsX蛋白在T4 UvsY蛋白的帮助下与引物结合形成复合体,这种复合体能...