下面将对这些转染方法进行详细比较。 1.化学法: 化学法是最简单、最常用的转染方法之一,主要通过化学试剂与DNA或RNA形成复合物,进而被细胞摄取。常用的化学试剂有钙磷酸盐、聚乙烯亚胺(PEI)、脂质体、高分子聚合物等。化学法的优势在于易操作、适用于不同细胞类型,且无需特殊设备。但其转染效率相对较低,引起细胞...
二、阳离子脂质体法(EZ Trans lipo pro) 原理:带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物,然后脂质体上剩余的电核与细胞膜上的唾液酸残基的负电核结合;另外细胞也可以过内吞作用而将包裹了DNA的纳米脂质体颗粒吞进细胞。 主要应用:稳定转染、瞬时转染、所有细胞 特点:使用方法简单,可携带大片段DNA,通用于...
以下是一些常见的转染方法的比较: 1. 离子交换法(Calcium phosphate transfection) 离子交换法是最早开发和使用的转染方法之一、它使用磷酸钙和DNA或RNA的复合物在细胞表面形成凝析沉淀物。该方法简单、经济且较为普遍,适用于许多细胞类型。然而,它的转染效率较低,存在较多的细胞毒性。 2. 迷走转染法(Lipofection) ...
电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。理想细胞转染方法,应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术...
一、化学转染法 化学转染法是最常见的细胞转染方法之一，它利用阳离子聚合物、脂质体或高分子聚合物等化学试剂将外源DNA或RNA导入到细胞内。这种方法操作简单，适用于大多数细胞类型，但转染效率较低，且对细胞有一定的毒性，可能影响细胞的生长和代谢活性。因此，在进行化学转染时，需要根据具体实验要求选择合适的试剂...
1、包二聚体转染 包二聚体转染是由三部分组成:DNA片段,10%二聚体和CaCl2溶液,将需要转染的DNA片段溶解在CaCl2溶液中,添加二聚体并调节pH值,即可形成包二聚体复合体,将复合体注入细胞内,从而达到转染目的。应用包二聚体的转染方法可以很好地穿越细胞膜,可以达到突变外源基因的目的,并且细胞损伤小,可以获得相对高...
细胞转染方法比较 脂质体转染步骤 细胞培养:细胞铺板,加入一定量的细胞培养液,37℃二氧化碳培养箱中培养,待细胞密度生长至80-90%时,准备转染。 在EP管中,加入无血清稀释的转染试剂,室温放置5min 在EP管中,加入无血清培养基稀释的DNA,室温放置 5min,并将二三步得到的两物质混合得到C液,轻轻混匀,室温下放置15-30...
其中,质粒转染(经典CaCl2转染)、电穿孔转染、膜融合转染、磁珠转染、膜膜转染、管状细胞转染(cylinder-mediated gene transfer)、病毒转染和小肠转染等转染方法,是目前比较常用的基因转染方法。 一、质粒转染 质粒转染是将外源DNA片段载体在质粒上,用极低的浓度CaCl2诱导细胞膜的瞬时通透性,使外源基因可以通过通透的细胞...
转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。
物理转染法:电穿孔法、显微注射法、基因枪法 化学转染法:磷酸钙共沉淀法、阳离子聚合物法、阳离子脂质体法 生物转染法:病毒介导法 对于了解或做过细胞转染实验的研究人员,想必上述方法大家都是非常熟悉的,我们也总结了这些方法的原理以及优缺点比较(表1),帮助大家找到适合自己实验的细胞转染方法。