反应产物H202可由过氧化氢酶进一步分解或被过氧化物酶利用。本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2-，O2-可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙，后者在560nm 处有最大吸收。而SOD可...
以每小时每克鲜重（FW）样品的反应体系对氮蓝四唑（NBT）光化还原的抑制为50%时为一个SOD活性单位（U）表示。计算公式如下：SOD活性(U·g⁻¹FW·h⁻¹) = [(A₀ - Aₛ) × Vt] / (A₀ × VS × t × FW)其中：A₀：光下对照管的吸光度值Aₛ：样品测定管的吸光度值Vt：样品提...
步骤1的上清液经适当稀释后用考马斯亮蓝 G-250法测定蛋白含量. 【实验结果及计算】 SOD活性单位是以抑制NBT光化还原的50%为一个酶活性单位表示。可按下式计 算SOD活性: SOD总活性= SOD比活力=SOD总活性/蛋白质总浓度 式中: SOD总活性以 U/gFW,比活力单位以 U/mg蛋白表示 ACK为对照杯(光照)的光吸收值;A...
在有氧化物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生超氧阴离子自由基,超氧阴离子自由基可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙,后者在560nm处有最大吸收。而SOD可清除超氧阴离子自由基,从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明酶活性愈低,反之酶活性愈高。据此...
也可以用以每分钟反应体系对氮蓝四唑（NBT）光化还原的抑制为50%时所需的酶量为一个SOD活性单位（U）。六、注意事项 1．需要通过预实验，摸索显色反应所需的时间。2．当测定样品数量较大时，可在临用前根据用量将表中各试剂（酶液和核黄素除外）按比例混合后一次加入2.6 mL，然后依次加入核黄素和酶液，...
超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 【实验原理】 SOD是含金属辅基的酶,它催化以下反应: 02 - +02 - + 2H+ H2 02 +02 由于超氧阴离子自由基02 - 寿命短,不稳定,不易直接测定SOD活性,而采用 间接的方法。目前常用的方法有3种, 包括氮蓝四唑(NBT)光化还原法,邻苯三酚自氧化法,化学发光法。本实验主要...
1/2氮蓝四唑(NBT)法测定超氧化物歧化酶活力一、原理超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)普遍存在于动､植物体内,是一种清除超氧阴离子自由基 2−的酶,它催化下列反应:2 2−+2 +→H2O2+ 2本反应产物H2O2可由过氧化氢酶进一步分解或被过氧化物酶利用。本实验依据超氧化物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT...
氮蓝四唑(NBT)法测定超氧物歧化酶(SOD)活力 一、原理 超氧物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)普遍存在于动、植物体内,是一种清除超氧阴离子自由基的酶.本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小.在有氧化物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再...
使用分光光度计在560nm处测定各管的吸光度值。 计算结果 以每小时每克鲜重(FW)样品的反应体系对氮蓝四唑(NBT)光化还原的抑制为50%时为一个SOD活性单位(U)表示。计算公式如下: SOD活性(U·g⁻¹FW·h⁻¹) = [(A₀ - Aₛ) × Vt] / (A₀ × VS × t × FW) 其中: A₀:光下...
SOD是普遍存在于动、植物体内,是一种清除超氧阴离子自由基的酶。本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2-,可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙,后者在560nm处有最大吸收。而SOD可清除...