本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠GSH-Px单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的GSH-Px与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠GSH-Px,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,GSH-Px浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线...
名称 人谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)ELISA试剂盒 英文名称 GSH-Px 规格 96T/48T 种属 人、大小鼠、鸡马牛羊兔狗猪鱼植物等 货期 现货 特点 特异性强,重复性好 贮藏 2-8℃ 使用方法 竞争法、夹心法、间接法 样本类型 血清,血浆,尿液,组织,细胞上清,腹腔液等 有效期 6个月 应用范围 用于科学...
对防止体内自由基引起膜脂质过氧化特别重要,其活力以催化GSH氧化的反应速度,及单位时间内GSH减少的量来表示,GSH和5,5’-二硫对硝基苯甲酸(DTNB)反应在GSH-Px催化下可生成黄色的5-硫代2-硝基苯甲酸阴离子,于423nm波长有最大吸收峰,测定该离子浓度,即可计算出GSH减少的量,由于GSH能进行非酶反应氧化,所以最后计算...
谷胱甘肽过氧化酶,简称为GSH-Px或GPx,是一个具有过氧化物酶活性的酶家族的总称,其主要生物作用是保护机体免受氧化损伤。谷胱甘肽过氧化酶的生化功能是将脂质氢过氧化物还原为其相应的醇,并将游离过氧化氢还原为水。几种同工酶由不同的基因编码,它们在细胞位置和底物特异性方面有所不同。
GSH-Px催化H2O2氧化GSH,产生GSSG;谷胱甘肽还原酶(GR)催化NADPH还原GSSG,再生GSH,同时NADPH氧化生成NADP+;NADPH在340nm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm光吸收减少速率来计算GSH-Px活性。生理功能 动物实验证明,老龄鼠肝和心肌中GSH-Px的活力显著高于幼龄鼠。大鼠缺氧时脑内GSH-Px显著下降,而脂类过...
三、人谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)ELISA KIT操作步骤 计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度...
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。 样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后...
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)是机体内广泛存在的一种重要的催化过氧化氢分解的酶。它特异的催化还原型谷胱甘肽(GSH)对过氧化氢的还原反应,可以起到保护细胞膜结构和功能完整的作用。GSH-PX的活性中心是硒半胱氨酸,硒是GSH-PX的必需部分,每克分子酶含4克原子硒。测定GSH-PX的活力可以作为衡量机体硒水平的一项生化...
检测原理:谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-PX)可以促进过氧化氢(H2O2)与还原型谷胧甘肽(GSH)反应生成H2O及氧化型谷胱甘肽(GSsG),谷胱甘肽过氧化物酶的活力可用其酶促反应的速度来表示,测定此酶促反应中还原型谷胱甘肽的消耗,则可求出酶的活力。 谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)是机体内广泛存在的一种...
谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)测定操作: 1.分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。 2.混合试剂在25℃或者37℃(哺乳动物)水浴中预热30min。 3.混合试剂配制:临用前,在试剂二中加入试剂一40 mL,充分震荡溶解后加入全部试剂三,混匀。(注意:必须现配现用,当天使用完) ...