蛋白免疫印迹(Western Blot,简称WB)是一种能够从细胞或组织提取的复杂蛋白质混合物中检测靶蛋白并对其进行半定量的常用实验技术,还可以鉴定和定量蛋白质中翻译后修饰的氨基酸。与蛋白质科学中其他常用的分析技术(如ELISA、IHC、质谱法和显微镜观察等)相比,WB可提供有关蛋白质分子量信息,区分分子量相近的蛋白,适合检测...
借助我们特有的免疫印迹iWestern流程,不但一天能完成2轮Western Blot,更能准确捕获到低至阿克(10-18g)的蛋白,让您的实验室生活变得更轻松、更高效,腾出时间专注于重要的数据分析工作,并对研究进行深入思考。 Step 1凝胶电泳 Step 2转印 Step 3印迹处理 Step 4印迹检测 Step 5成像和分析 小型预制胶和中型预制胶...
根据孔的大小，每条泳道10-50µg的总蛋白量就足够了。但是，如果使用纯蛋白质，这个重量可能会过于浓缩。低丰度蛋白可能需要浓缩，以便于western blot检测。纯化标记(如HIS6标记)允许使用亲和柱(如镍)浓缩蛋白质。确保洗脱缓冲液与加载缓冲液兼容是很重要的。另外，如果有针对特定蛋白质的抗体，可以使用免疫沉淀等方...
蛋白免疫印迹实验,或Western Blot(又称为免疫印迹,因为使用了抗体来特异性检测其抗原)于1979年由 Towbin 等人提出,现在已是常规的蛋白分析技术。抗体-抗原相互作用的特异性实现了复杂蛋白质混合物中的靶蛋白识别。通过蛋白免疫印迹可获得关于目标蛋白质的定性和半...
Western Blot实验原理 蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)是将蛋白质经电泳分离后转移到膜上,然后利用抗体进行检测的技术。完整的WB流程,如下图所示,包含样本制备、SDS-PAGE、转膜、抗体结合、蛋白检测等5个大步骤。 实验步骤 1. 样本制备 1)融解RIPA裂解液(RIPA裂解液-细胞/组织裂解液缓冲液),混匀。取适当量的裂解...
简介:Western blot又称蛋白质免疫印迹实验,是分子生物学和免疫遗传学中广泛使用的分析技术,用于检测细胞分泌物或裂解物、组织匀浆或提取物样品中的特定蛋白质。实验的基础来源于物质分子量的不同(蛋白质电泳)和抗体特异性结合(ELISA)。实验步骤包括: ①实验...
印迹法(blotting) 是指将样品转移到固相载体上,而后利用相应的探测反应来检测样品的一种方法。 Western Blot采用的是变性聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分离蛋白质混合物,经过SDS-PAGE分离的蛋白质被转移到固相支撑物(NC膜, PVDF膜等) 上后,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质...
蛋⽩质印迹法（免疫印迹试验，WesternBlot）蛋⽩质印迹法（免疫印迹试验）即 Western Blot。它是分⼦⽣物学、⽣物化学和免疫遗传学中常⽤的⼀种实验⽅法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或⽣物组织样品进⾏着⾊。通过分析着⾊的位置和着⾊深度获得特定蛋⽩质在所分析的...
详解WB实验基本原理及操作步骤 一、WB实验的基本原理：蛋白质免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志，检测蛋白质的方法很多，除 ELISA 法外，也可用与检测 DNA 和 RNA 相类似的吸印方法...