原位杂交与免疫荧光原理:原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。免疫荧光就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体或抗原上,与其相应的抗原或抗体结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反...
原位杂交是从分子水平检测,免疫荧光是从蛋白水平检测。 免疫荧光是利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。 荧光原位杂交方法是一种物理图谱绘制方法,使用荧光素标记探针,以检测探针和分裂中期的染色体或分裂间期的染色质的杂交。 荧光原位杂交的原理: FISH(fluorescence in situ hybridization)技术是一种重要的...
FISH:采用了已知序列的、特异性的单链核酸作为探针,标记了生物素或荧光素,在一定的温度和离子浓度下通过碱基互补配对法则,使得DNA-DNA原位杂交,采用荧光法显示,最终将DNA在细胞爬片、组织切片(石蜡切片or冰冻切片)的原始位置上标记出来的一种技术。 上一代的FISH还是采用的同位素进行标记,现在基本上都是荧光标记了。...
荧光原位杂交(FISH)和免疫荧光双标(IF)同时检测石蜡切片中circRNA和NeuN蛋白共定位表达情况。检测结果显示,二者存在共定位表达。(探针绿色标记为circRNA,抗体红色标记为NeuN蛋白,黄色Merged表示二者存在共定位表达 - 茹创茹凡生物-夏经理🇨🇳于20240323发布在抖
FISH分为直接法和间接法。 直接法是在已知碱基序列的核酸探针上标记荧光素,在组织切片、间期细胞及染色体标本上与靶核酸进行原位杂交。因所形成的杂交体带有荧光素。故可在荧光显微镜下直接观察。 间接法使用非荧光物质标记的核酸探针。如生物素或地高辛等标记探针,再...
01什么是FISH FISH:采用了已知序列的、特异性的单链核酸作为探针,标记了生物素或荧光素,在一定的温度和离子浓度下通过碱基互补配对法则,使得DNA-DNA原位杂交,采用荧光法显示,最终将DNA在细胞爬片、组织切片(石蜡切片or冰冻切片)的原始位置上标记出来的一种技术。
FISH分为直接法和间接法。直接法是在已知碱基序列的核酸探针上标记荧光素,在组织切片、间期细胞及染色体标本上与靶核酸进行原位杂交。因所形成的杂交体带有荧光素。故可在荧光显微镜下直接观察。间接法使用非荧光物质标记的核酸探针。如生物素或地高辛等标记探针,再通过亲和连接或免疫反应带入荧光物质来检测杂交体的存在...
二、冰冻切片荧光探针原位杂交+免疫荧光实验步骤1、组织固定:组织取出洗净后立即放入4%多聚甲醛(DEPC水配制)固定1-2h 。2、脱水:固定后组织放入15%蔗糖溶液中8h,后换30%蔗糖溶液中过夜。3、冰冻切片固定:冰冻切片室温晾干,置于4%多聚甲醛(DEPC)固定10min, 于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
近来,有伙伴在后台咨询了荧光原位杂交(FISH)实验的相关知识,因此小编想在今天推文简单聊一聊FISH实验,也讲点新花样。 01 — 什么是FISH FISH:采用了已知序列的、特异性的单链核酸作为探针,标记了生物素或荧光素,在一定的温度和离子浓度下通过碱基互补配对法则,使得DNA-DNA原位杂交,采用荧光法显示,最终将DNA在细胞...
原位杂交是从分子水平检测，免疫荧光是从蛋白水平检测。免疫荧光是利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。荧光原位杂交方法是一种物理图谱绘制方法，使用荧光素标记探针，以检测探针和分裂中期的染色体或分裂间期的染色质的杂交。荧光原位杂交的原理：FISH（fluorescence in situ hybridization）技术是一...