1.制作标准曲线:准确称取标准葡聚糖(或葡萄糖)20mg于500ml容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml,然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却,室温放置20分钟以后于490nm测光密度,以2.0ml水按同样显色操作为空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标为光密度值,...
含蛋白样品采用Sevage法去蛋白,按氯仿:正丁醇=4:1比例震荡乳化,离心去除变性蛋白层,重复操作至界面无沉淀。色素干扰可采用活性炭吸附法,添加1%活性炭震荡30分钟后过滤。处理后的样品溶液需调整至中性,避免强酸强碱影响显色反应。 显色反应操作需严格控制时间节点。样品液与苯酚试剂混合后应立即加入浓硫酸,延迟超过10...
苯酚硫酸法的原理 苯酚硫酸法是一种常用的有机合成方法,用于合成苯酚磺酸盐。其原理是利用苯酚与浓硫酸反应生成苯酚磺酸盐。 苯酚(化学式C6H6O)是一种具有酸性的有机化合物,可以与强酸反应生成相应的磺酸盐。而硫酸(化学式H2SO4)则是一种强酸,具有较高的酸性。当苯酚与浓硫酸反应时,会发生酸碱中和反应,生成苯酚...
🌡️原理:利用苯酚硫酸法测定多糖含量,是通过糖类化合物在浓硫酸的脱水作用下,与苯酚缩合形成橙红色化合物,该化合物在490nm波长处有最大吸收峰。橙红色的深浅与糖含量成正比,从而可以定量测定多糖的含量。📊绘制标准曲线:首先,精确称取无水葡萄糖10mg,配置成0.1mg/mL的葡萄糖标准液。然后,通过移液枪吸取不同...
硫酸苯酚法的原理首先,咱们得搞清楚这个方法的原理。多糖在浓硫酸的作用下会脱水生成糠醛或者羟甲基糠醛。这些物质能和苯酚反应生成一种橙红色的化合物,这种化合物在490nm处有最大的吸光度。🌈 标准曲线的制作接下来,我们来看看如何制作标准曲线。首先,取0.1000克葡萄糖,放入恒温干燥箱中干燥至恒重,然后加入蒸馏水溶...
苯酚硫酸法的原理基于硫酸对多糖的糖基的磺化作用。在浓硫酸的作用下,多糖中的羟基(-OH)被磺酸基(-SO3H)取代,形成硫酸酯化合物。这种化学反应是一个酸催化的过程,通过加热可以加快反应速率。 同时,苯酚的加入有助于糖类分子的分解,使得多糖更容易受到硫酸的作用,从而提高了反应的效率。
其原理基于苯酚与硫酸反应生成强酸性溶液的化学特性。 在硫酸苯酚法中,首先将待测物样品与苯酚混合,在加入适量的浓硫酸。苯酚和硫酸反应生成苯酚磺酸,该反应能发生的条件是要求样品中有羟基化合物存在。苯酚磺酸是一种强酸性溶液,因此在生成的溶液中,pH值会显著降低。 反应完成后,可通过观察溶液的颜色变化来判断样品...
苯酚—浓硫酸法测糖含量原理是糖样品在浓硫酸作用下,迅速脱水生成糖醛衍生物,然后和苯酚缩合反应,显橙黄色,在波长490 nm处和一定浓度范围内,其吸光度和糖浓度呈线性关系用比色法与葡萄糖标准系列比较进行定量分析。 ①标准曲线的测定 取100 mg,用蒸馏水定容至1000 mL,得到浓度为0.01%的葡萄糖标准溶滚。分别稀释...
制作标准曲线时，首先准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，并加水至刻度。然后，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml，各以蒸馏水补至2.0ml。加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml，摇匀后冷却至室温，放置20分钟后，在490nm测量光密度。使用2.0ml水进行相同...