考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)染料,在游离状态下溶液呈棕红色,当它与蛋白质结合后变为蓝色。蛋白质含量在0~1000μg范围内,蛋白质-色素结合物在595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用比色法进行定量分析。考马斯亮蓝G-250法(Bradford法)是比色法与色素法相结合的复合方法,简便快捷,灵...
度与蛋白质含量成正比,故可用比色法进行定量分析。考马斯亮蓝G-250法(Bradfbrd法)是比 色法与色素法相结合的复合方法,简便快捷.灵敏度高,稳定性好,是一种较好的赍白质常用 分析方法。相关知识点: 试题来源: 解析 反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。是阳的特征物理学常数之一。近似表示酶与底物的亲 和...
蛋白质含量测定(考马斯亮蓝G-250法)一、目的 考马斯亮蓝(Coomassie brilliant blue) G-250法是比色法与色素法相结合的复合方法，由Bradford于1976年建立，具有简便快捷，灵敏度高，稳定性好等特点，是一种较好的蛋白质定量测定常用方法。通过本实验学习应用该法测定蛋白质含量的原理，复习分光光度计的使用及标准...
二实验材料1实验设备电子天平分光光度计恒温水浴锅2试剂考马斯亮蓝g250牛血清蛋白nacl95乙醇85磷酸三操作步骤一试剂配制1考马斯亮蓝g250溶液配制准确称取01考马斯亮蓝g250溶于50ml95乙醇加入100ml85磷酸最后用蒸馏水稀释定容到1000ml 考马斯亮蓝法测定蛋白浓度 一、实验原理 考马斯亮蓝G250比色法,也被称为...
在酸性环境中,蛋白质带正电荷( –NH 3+ )与考马斯亮蓝 G-250 阴离子结合为蓝色的染料 – 蛋白质复合物后,其最大吸收峰变为 595 nm 。蛋白质含量在 1 ～ 1000μg 范围内,蛋白质 – 染料复合物在 595 nm 处的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用比色法测定。 蛋白质 – 染料复合物具有很高的吸光值,...
考马斯亮蓝G-250染料结合比色法测定蛋白质含量【目的】1.掌握考马斯亮蓝G-250染料结合比色法测定蛋白质含量的原理和方法。2.熟悉标准曲线的绘制及分光光度计的使用。【原理】考马斯亮蓝G-250(CoomassiebrilliantblueG-250)为醇溶性蛋白质染料。在游离状态下呈红色,最大吸收峰在465nm。在酸性环境中,蛋白质带正...
掌握和学习考马斯亮蓝G-250染色法测定蛋白质含量的基本方法 一原理 465nm 棕红色酸性溶液中 与蛋白质疏水区结合 考马斯亮蓝G-250染料 青蓝色 595nm 在一定蛋白质浓度范围内(1-1000ug)，蛋白质和色素结合物在595nm波长下的吸光度与蛋白质浓度成正比，故可用于蛋白质的定量测定 简便快捷，灵敏度高，稳定性好 ...
考马斯亮蓝G-250染色法实验步骤: (一)标准曲线的绘制 取6支具塞试管,按表1加人试剂(0-100 ug/mL的标准蛋白)。混合均创后,向各管中加人5 ml考马斯亮蓝G-250溶液,摇匀,并放置5min左右,用1cm光径比色皿在595nm下比色测定吸光度。以蛋白质浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标绘制标推曲线。
【实验目的】学习掌握考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理和方法。【实验原理】考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，与蛋白质结合则呈现蓝色。染料的最大吸收从465nm变为595nm，蛋白质－染料复合物具有很高的消光系数，因此蛋白质测定的灵敏度较高，最低检出量为1µg蛋白质。特点：1、染料与蛋白质的结合，...
考马斯亮蓝G-250在酸性溶液中为棕红色,当它与蛋白质通过范德华键结合后,变为蓝色,且在蛋白质一定浓度范围内符合比尔定律,可在595nm处比色测定。2—5分钟即呈最大光吸收,至少稳定1小时。在0.01—1.0 mg蛋白质/ml范围内均可。该法操作简便迅速,消耗样品量少,但不同蛋白质之间差异大,且标准曲线线性差。高浓度...