背景:WB检测 Hela细胞样本中 FOXA2 的蛋白水平 三组样本:CON组;NC组;OE-FOXA2组 目的基因:FOXA2 内参基因:β-Actin 上样原则: 上样质量一致:每孔样本的上样质量保持一致(20-50ug,一般取20ug) 上样体积一致:每孔样本的上样体积保持一致 蛋白含量测定后,等体积等质量上样,计算上样体积时需包含 loa
内参也叫看家基因,在组织或细胞中都会表达,且表达量在不同组织或细胞中几乎是相同的,一般有α-Tublin,β-actin,GAPDH等,在WesternBlotting中使用内参,其实就是在WB过程中用内参对应的抗体检测内参。主要有两个原因:一、看提取蛋白质量的好坏。如果做western的时候,内参照蛋白有条带,而目的蛋白没有,说明蛋白的提取和...
WB实验之内参选择攻略。在进行WB实验时,选择合适的内参是非常重要的。内参是用来校正样本上样量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性的。选择内参时需要遵循的原则主要包括: 1.样本种属来源:根据实验样本的来源选择合适的内参。例如, - 科研集中营于202408
(1.5mm),1ml移液枪,751/722玻璃比色皿,5ml普通巴氏吸管,5ml无菌巴氏吸管,WB抗体孵育盒,western转膜滚轮,1M Tris-HCl,Precast-Gel变性预制胶,FastKing一步法RT-PCR试剂盒(KR123),引物合成,基因测序,SDS-PAGE凝胶配置试剂盒(30-50块胶),超低温存储冻存盒,无菌细胞培养板(6孔板),无菌细胞培养板(96孔板),青...