实验一:细胞增殖分析 1)制备细胞悬液,计数。 2)在96孔板中接种细胞悬液,每孔约100μl,同样的样本可做3个重复。 3)将培养板放入培养箱中预培养一段时间(37℃, 5%CO2),细胞贴壁需要大约2-4h,如果是悬浮细胞,该步骤可以省去。 4)每孔各加入10μl CCK-8溶液,由于加入的CCK-8量比较少,可能会因试剂沾在孔...
(1)CCK-8 使用更为方便,无需洗涤细胞; (2)CCK-8 法能快速检测; (3)CCK-8 法的检测线性范围广,灵敏度更高; (4)CCK-8 法的重复性更好 (5)CCK-8 法对细胞毒性小,可以保持细胞原状态; (6)CCK-8 法试剂价格较高; 2.与 LDH 法相比: (1)CCK-8 ...
在做加药实验(细胞毒性实验)时,还应考虑药物的吸收,可在加入药物的培养基中加入 CCK-8,培养一定的时间,测定 450 nm 的吸光度作为空白对照。 5)影响 CCK-8 测定的物质:由于 CCK-8 检测细胞活性的原理是通过检测活细胞脱氢酶催化的反应,所以如果待测体系中存在氧化还原物质则可能会干扰检测结果,还原物质会使吸光...
8. 如果实验中待测物质有氧化还原剂,在不含细胞的培养基中加入药物,然后加入 CCK-8 试剂在一定时间内检测,和不加药物的培养基进行比较 (只加 CCK-8 试剂),如果 OD 值明显偏高,则说明有反应。 9. 加 CCK-8 试剂时速度要快,减少试剂在移液器上的残留,加入 CCK-8 试剂后轻轻震培养板,为了避免加样时由于...
CCK-8,英文全称是Cell Counting Kit-8。CCK-8试剂盒可用于简便而准确的细胞增殖和细胞毒性分析。 实验原理 CCK-8试剂盒中,最主要化学药品是WST-8【化学名为2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四...
二者相比较,LDH法在检测时直接反映了细胞的死亡率,即测定的吸光度越高,表明检测物质的细胞毒性越强。同时,LDH法也可用于细胞膜损伤实验。因其方法本身对细胞伤害较小,且不存在放射性同位素(如铬51)污染,适合在实验室进行操作。但其操作方法较CCK-8法相比略复杂,需要依据“0%细胞毒性”和“100%细胞毒性”...
🔬 CCK-8细胞毒性实验是生物学研究中常用的方法,用于评估药物或其他因素对细胞活力的影响。以下是实验的详细步骤和原理:1️⃣ 细胞准备:首先,将生长状态良好的细胞进行消化、离心和计数,确保细胞的活力。2️⃣ 铺板:将调整好浓度的细胞悬液均匀铺到96孔板中,每孔约3-5千个细胞,并设置4-6个重复孔。3...
细胞毒性检测:利用细胞培养技术,采用细胞毒性试验评价一种器材、材料或药物引起的细胞死亡、细胞生长抑制或者细胞方面其他的影响。 CCK-8(Cell Counting Kit-8)检测法,是一种常用的测定细胞增殖或者细胞毒性试验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK-8检测法具有灵敏度高、重现性好、可直接加入细胞...
CCK-8是 Cell Counting Kit-8的简称,CCK-8性能很稳定,在室温避光的情况下可以保存6个月,在2-8℃可以保存2年,-20℃以下可以更长时间保存。 优点:(1)比MTT更敏感;(2)对细胞无毒性(3)步骤简单(4)性能稳定等。 原理 Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒),是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝...
CCK-8法 CCK-8实验原理:Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。 该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧...