根据磷酸氨基酸残基的不同，可将磷酸化蛋白质分为4类，即O-磷酸盐蛋白质、N-磷酸盐蛋白质、酰基磷酸盐蛋白质和S-磷酸盐蛋白质。• O-磷酸盐蛋白质通过羟氨基酸（如丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸）的磷酸化形成• N-磷酸盐蛋白质通过精氨酸、赖氨酸或组氨酸的磷酸化形成• 酰基磷酸盐蛋白质通过天冬氨酸或谷氨酸的...
1. 高效的富集能力:26000+位点 2. 稳定的富集能力:富集效率维持在90%以上 3. 多位点磷酸化肽比例高 3 全自动化磷酸化富集流程 相比于常规的实验流程,磷酸化肽段富集试剂盒PEB可以良好适配自动化流程。结合青莲百奥最新发布的智慧实验室——Magic Show,覆盖从蛋白质提取、质量控制、低丰度富集、还原烷基化、酶解...
对于微量样品的磷酸化蛋白质组分析,我们测试了1 µg至100 µg 不同肽段起始量的293T酶切肽段样品,采用Fe NTA agarose – 96 C8Tip进行磷酸化富集实验,实验结果显示,1 µg、5 µg、10 µg、20 µg、50 µg、100 µg 293T分别能够鉴定到1960、7806、10113、13860、15703、17452个磷酸化肽...
TiO2-功能性磁珠(Si-TiO2)是一种专有的磁性材料微粒载体,能在复杂生物样品的蛋白消化物中简单、方便、高效、高特异、高重复性富集磷酸化肽。磁珠表面的二氧化钛纳米粒子对于单磷酸化肽和多磷酸化肽没有明显的偏好,因而非常适合单步富集磷酸化肽用于基于质谱的蛋白质组学分析。Si-TiO2以其出色的特异性,超越竞争对手...
所以,你可以根据自己的实验背景和目标选择相应的富集方法。 - 3大策略:富集互补(详情见视频 10分30秒) 案例分析,将未经或已经 CD3 抗体处理的 jurkat 细胞裂解物消化成肽,随后进行三种不同的磷酸化富集,再进行质谱分析。 图4 定性水平 从覆盖范围(图4)水平来看,3种方法检测到的涉及T细胞信号通路中的磷酸肽中,...
1. 富集方法-独家重组单克隆抗体:相较于IMAC/TiO2及传统的泛抗体、SH2 domain等富集方法,景杰生物PTMab抗体平台全新开发的酪氨酸磷酸化重组单克隆抗体,具有更高的一致性和重复性,大幅提升修饰肽段富集特异性和灵敏度! 2. 检测平台-10X Proteomics平台:作为蛋白质组学与修饰组学分析行业领跑者,景杰生物拥有业内最...
1、 Q:目前常用的磷酸肽富集方式有哪些? A:TiO2、IMAC。 2、 Q:目前研究磷酸化蛋白组学常用的技术有哪些? A:DIA、iTRAQ、Lable free。 3、 Q:磷酸化鉴定数目的多少受什么影响? A:样本本身的磷酸化水平、磷酸化富集方法、数据库。 4、 Q:磷酸化蛋白组学需要参考基因组吗?
1. 富集方法分类 磷酸化肽段的富集方法,是整个实验流程中最多变的部分。磷酸基团与金属亲和的方案是最流行的方案,其中应用最广泛的两种是固相金属离子亲和色谱(immobilized metal affinity chromatograph, IMAC)和金属氧化物亲和色谱(metal oxide affinity chromatography,MOAC)。
IMAC富集磷酸化肽段的步骤：以Fe3+-IMAC为例，首先，Fe3+-IMAC将Fe3+螯合到色谱固定相上，样品中磷酸肽段与Fe3+特异异性结合从而被选择性吸在固定相上。然后用磷酸盐或高pH溶液洗脱下富集的磷酸化肽段。IMAC富集方法可选择性的富集磷酸化肽段，对含有多个酸性残基的磷酸化多肽也同样具有非特异性结合吸附能力，...
然而,由于Ⅳ-磷酸化修饰具有独特的P—N键结构,导致其化学稳定性差。尤其是在O一磷酸化肽段富集常用的酸性条件下,Ⅳ-磷酸化极易丢失。因此,目前对Ⅳ_磷酸化蛋白质的研究仍处于初始阶段。该文针对蛋白质Ⅳ-磷酸化修饰的特点、富集和鉴定方法进行了综述,并对其发展前景进行了展望。关键词:蛋白质Ⅳ_磷酸化修饰;富集...