将YTHDF1或METTL14按不同分组分别或同时转染RAW264.7细胞,并制备用于进一步研究。TRAP染色和F-actin带染色检测4组破骨细胞分化情况;比例尺:200 μm。4组TRAP阳性破骨细胞数量、覆盖率及细胞核直方图。4组RAW264.7细胞中Ctsk、MMP9和Acp5的相对表达水平。分别采用RT-qPCR和western blot分析4组RAW264.7细胞中NFATc1...
首先,将METTL14转染至RAW264.7细胞并制备用于进一步研究。 TRAP染色和F-actin带染色检测两组破骨细胞分化情况。比例尺:200 μm。 两组TRAP阳性破骨细胞数量、覆盖率、细胞核直方图。 两组RAW264.7细胞中Ctsk、MMP9和Acp5的相对表达水平。 ZOL刺激后,将si-METTL14转染到RAW264.7细胞,制备用于进一步研究。 TRAP染色...
首先,将METTL14转染至RAW264.7细胞并制备用于进一步研究。 TRAP染色和F-actin带染色检测两组破骨细胞分化情况。比例尺:200 μm。 两组TRAP阳性破骨细胞数量、覆盖率、细胞核直方图。 两组RAW264.7细胞中Ctsk、MMP9和Acp5的相对表达水平。 ZOL刺激后,将si-METTL14转染到RAW264.7细胞,制备用于进一步研究。 TRAP染色...
首先,将METTL14转染至RAW264.7细胞并制备用于进一步研究。 TRAP染色和F-actin带染色检测两组破骨细胞分化情况。比例尺:200 μm。 两组TRAP阳性破骨细胞数量、覆盖率、细胞核直方图。 两组RAW264.7细胞中Ctsk、MMP9和Acp5的相对表达水平。 ZOL刺激后,将si-METTL14转染到RAW264.7细胞,制备用于进一步研究。 TRAP染色...
与人兽共患病防控协同创新中心,江苏 扬州 225009 )摘 要:采用 Wistar 大鼠骨髓单核细胞及 RAW264.7 细胞在体外诱导分化为破骨细胞( OC),通过抗酒石酸酸性磷酸酶( TRAP )染色鉴定破骨细胞,荧光显微镜观察破骨细胞骨架F -actin ,扫描电子显微镜检测骨吸收陷窝,比较两种方法诱导形成的破骨细胞细胞骨架 F-actin 的...
2.5破骨细胞F-actin环染色及观察 将生长状态良好的BMMs以1×105个/孔接种于激光共聚皿中培养24 h,用含30 ng/mL M-CSF、50 ng/mL sRANKL以及0.1、1.0、10.0 μmol/L升麻三萜皂苷(阿克特素、升麻环氧醇苷、升麻醇)的完全培养基,另设置对照组(加入...
TRAP染色和F-actin带染色检测两组破骨细胞分化情况。比例尺:200 μm。 两组TRAP阳性破骨细胞数量、覆盖率、细胞核直方图。 两组RAW264.7细胞中Ctsk、MMP9和Acp5的相对表达水平。 将NFATc1或METTL14按不同分组分别或同时转染RAW264.7细胞,制备用于进一步研究。
TRAP染色和F-actin带染色检测两组破骨细胞分化情况。比例尺:200 μm。 两组trap阳性破骨细胞数量、覆盖率、细胞核直方图。 两组RAW264.7细胞中Ctsk、MMP9和Acp5的相对表达水平。 ZOL刺激后破骨细胞分化差异表达基因的热图。 KEGG分析揭示了三个交集的差异表达基因:破骨细胞分化基因,MeRIP高表达基因和mRNA下调基因...
破骨细胞分化:成熟的破骨细胞由骨髓单核细胞分化而来,骨髓细胞在巨噬细胞克隆刺激因子的诱导下形成骨髓单核细胞,在巨噬细胞克隆刺激因子和RANKL的诱导下,骨髓单核细胞逐渐分化,形成成熟破骨细胞,成熟破骨细胞TRAP染色呈阳性,F-actin是破骨细胞行使骨吸收功能的重要结构,帮助破骨细胞在体内行使骨吸收功能。
体外实验证实CCA可显著抑制破骨细胞F-actin环的形成,抑制与破骨细胞形成相关的Integrinβ3、NFATc1和c-Fos蛋白的表达,同时抑制与骨吸收功能相关的CTSK蛋白的表达,且通过p38/MAPK和NF-κB通路调节破骨细胞分化。 NFATc1是破骨细胞分化的主要转录调节因子,NFATc1缺失可导致胚胎干细胞无法形成破骨细胞[19];在小鼠模型...