化合物的荧光可以通过一系列过程淬灭,即减少或完全关闭,而不会永久破坏荧光团。因此,荧光淬灭效应降低...
探索分子信标中的荧光与淬灭奥秘在分子信标的精密构造中,荧光基团与淬灭基团的选择犹如精准的化学舞蹈,它们的协同作用直接影响信标性能的发挥。荧光共振能量转移(FRET)原理的核心在于,当荧光基团与淬灭基团紧密相邻时,淬灭基团会吸收激发荧光,这一过程的强度与两者间的空间距离息息相关。FRET的公式E=1/...
20到30个。根据查询X技术显示,荧光基团和淬灭基团之间的距离会影响荧光信号的强度和检测的灵敏度,在常见的单淬灭探针中,荧光基团与淬灭基团间在20到30个碱基之间。
图一:探针的示例图: 图二:不同探针荧光标记和淬灭基团的选择: 图三:荧光基团(以FAM为例)修饰图: 图四:荧光基团VIC修饰图: 图四:荧光基团ROX修饰图: 图五:荧光基团ROX修饰图: 不同的淬灭基团-BHQ1: 不同的淬灭基团-BHQ2: 不同的淬灭基团...
常用的荧光基团和淬灭基团组合有哪些? DABCYL/ EDANS,DABCYL/6-FAM,TAMRA/6-FAM,Abz/Tyr(3-NO2), Mca/Dnp 同位素标记多肽能提供哪些? 合肥肽库生物科技可以提供一些稳定同位素修饰的多肽,主要有N15, C13 以及D代修饰,由于稳定同位素氨基酸原料都比较贵,建议选择一些简单氨基酸进行标记,如Gly,Val,Phe,Leu,Ala等...
测出来的荧光强度会稍显不同(其他牌⼦的机型好像分不太出来)。当然还有⼀款叫Yakima Yellow的替代品,可以代替VIC,但这就需要慎重选择淬灭基团了。当然,除了荧光基团的筛选,更重要的是筛选TaqMan探针的淬灭基团。⽐如,尽量不要选TAMRA作为淬灭基团。为啥?因为TAMRA本⾝就是⼀个荧光基团,虽然它也有淬灭...
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针两端分别标记一个报告荧光基团(Q蛋白质)和一个淬灭荧光基团(R蛋白质)。开始时,探针完整地结合在DNA任意一条单链上,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收,检测不到荧光信号;当Taq DNA聚合酶催化子链延伸至探针R处,会水解淬灭荧光基团,荧光监测系统从...
)。当然还有一款叫Yakima Yellow的替代品,可以代替VIC,但这就需要慎重选择淬灭基团了。 当然,除了荧光基团的筛选,更重要的是筛选TaqMan探针的淬灭基团。比如,尽量不要选TAMRA作为淬灭基团。 为啥? 因为TAMRA本身就是一个荧光基团,虽然它也有淬灭作用,但会加强本底荧光强度。当然还有,可能你也分不清BHQ1和BHQ2有啥区...
)。当然还有一款叫Yakima Yellow的替代品,可以代替VIC,但这就需要慎重选择淬灭基团了。 当然,除了荧光基团的筛选,更重要的是筛选TaqMan探针的淬灭基团。比如,尽量不要选TAMRA作为淬灭基团。 为啥? 因为TAMRA本身就是一个荧光基团,虽然它也有淬灭作用,但会加强本底荧光强度。当然还有,可能你也分不清BHQ1和BHQ2有啥区...
MGB作淬灭基团可以将探针的Tm值提高10℃左右,提高配对与非配对模板间的Tm值差异;由于探针3‘端的Quencher基因为不发光的荧光基团,并且与Report基团的空间位置更接近,可以使实验的结果更精确,分辩率更高;实验优化,步骤简单,重复性大大提高。用这种探针可以降低本底,且酶切更简单易行,因此实验的重复性和准确度得以大大...