因此,在使用FITC时需格外注意溶液的酸碱度。 02 藻红蛋白 Phycoerythrin,PE是从红藻中分离纯化获得的一种常见染料,经激光激发后发出橙黄色荧光,最大发射波长为575nm。PE具有吸光性能好和光量子产率高的特点,可用于标记表达水平较低的蛋白。在流式细胞术检测中,PE标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式...
PE-FITC补偿可以有效纠正荧光重叠造成的检测误差,提高流式细胞术的准确性和可靠性。在实验中,如果没有进行PE-FITC补偿,可能会导致误判或漏判的情况出现,影响实验结果的准确性和可靠性。 总之,PE-FITC补偿是流式细胞术中非常重要的一步,需要认真进行。通过合理的补偿调节,可以有效纠正荧光重叠误差,提高实验结果的准确...
在流式细胞术或荧光标记实验中，FITC（异硫氰酸荧光素）、PE（藻红蛋白）和APC（别藻青蛋白）是三个常用的荧光通道。每个通道都有其特定的激发和发射波长，因此在选择染料进行配色时，需要确保所选染料的光谱特性与通道相匹配，并尽量减少荧光溢出和补偿问题。FITC通道 推荐染料：FITC本身就是一种常用的绿色荧光染料...
3、荧光素之间的光谱重叠最小化：尽量选择光谱重叠小的荧光素组合，如FITC/PE-Cy7；选择不同激光激发的荧光素组合，如FITC/APC、PE/APC。4、避免复合染料联合使用带来的假阳性：常见的复合染料有PE-Cy5、PE-Cy5.5、PE-Cy7、PerCP-Cy5.5、APC-Cy7等，复合染料的信号衰退会降低APC或PE的灵敏度。如果出现信号...
FL1接收到的荧光信号代表FITC荧光素信号,也称为FITC通道,FL2接受到的信号代表PE荧光素的信息,称为PE通道。当只标记FITC偶联的抗体时,当样本中存在相应抗原分子后,FL1通道即接受到FITC荧光素所激发的荧光信号,占80%,但FL2同时也能接受到荧光信号,占10%。由于只标记了FITC偶联抗体,并不需要考虑FL2的荧光信号。当...
以FITC和PE为例来看光谱重叠。FITC单染管的荧光会部分漏到PE通道中，而这部分需要从PE通道中减掉溢漏...
FITC和CY5-PE流式细胞术双标记用于蛋白和多肽的检测,是一种通过同时使用两种不同荧光标记物来分析细胞表面或内部特定蛋白质和多肽的技术。FITC(绿色荧光素异硫氰酸酯)和CY5-PE(CY5偶联到PE,藻红蛋白)的双标记策略可以在同一次实验中标记两个目标,从而在流式细胞仪中区分和分析不同的生物分子。
如果纵坐标是FITC，横坐标是PE。调节电压后，阴性的细胞位于左下象限。这是可以得出阴性细胞横坐标（PE...
以FITC-PE为例。在散点图上，划分为四个象限。如果纵坐标是FITC， 横坐标是PE。调节电压后，阴性的细胞位于左下象限。这是可以得出阴性细胞横坐标（PE）和纵坐标（FITC）的平均荧光强度值。电压调好以后，上单色阳性样本。比如上牌FITC阳性，这时不要再改变电压了，而是调节补偿系数，最终目的就是让...
PE：藻红蛋白常和FITC一起用于流式细胞术双标记实验。FITC：FITC是广泛使用的荧光基团，但其最大的缺点是淬灭快，使用抗淬灭剂可以减轻。花菁染料（Cy2,Cy3,Cy5）：Cy2比FITC更稳定，且在表面荧光显微镜下，Cy2的荧光FITC更强。Cy3和Cy5比大多数荧光基团更亮，更稳定，背景更弱。二者常在共聚焦显微实验中作多...