● FSC-SSC的作用:利用细胞大小和颗粒度初步区分细胞群、去除细胞碎片、去除黏连细胞。从细胞进入激光照射区到离开,产生一个电脉冲信号。H是脉冲高度,代表脉冲信号的峰值;W是脉冲宽度,是指细胞通过激光照射区域的时间;A是脉冲信号的面积。实际操作中,部分细胞与细胞会粘在一起,连续通过激光照射区,被仪器认定...
所以可以利用细胞的SSC值初步比较细胞的颗粒度,利用SSC值对细胞进行分群和分类。一般在硏究细胞样品时,首先关注的就是样品中细胞的FSC-SSC散点图,x轴代表FSC值,y轴代表SSC值,将细胞都显示于该散点图中,可以初步根据细胞的大小和颗粒度对细胞进行分群和分类。样品细胞不需要标记任何荧光素偶联抗体,直接上样分...
首先对FSC-A/SSC-A图多边形圈出P1门筛选出细胞,再对FSC-A/FSC-H圈出不粘连的细胞P2门,后面可以根据情况再圈出死活细胞门 FSC-A/SSC-A中P1门(红色 FSC-A/FSC-H图中P1门子集P2门(绿色 完成后下Blank管,设置上样速率为1并load实验样本管,在P1,P2门的基础上在荧光通道上圈出目的细胞群P3,P4等门,分析...
这六幅图是正常小鼠脾脏淋巴细胞分群流式散点图 图A——是所有脾脏单个核细胞的FSC-SSC散点图,设门于淋巴细胞(即圈出其中的淋巴细胞群),可得到B、D两幅流式散点图。 图B——显示的是脾脏淋巴细胞CD3-CD19散点图。从图中可见,脾脏淋巴细胞主要包括CD3+CD19-T淋巴细胞和CD3-CD19+B淋巴细胞两群细胞,分别...
利用PE-Cy5通道非标记阳性细胞区分活细胞和死细胞时,流式图分析的顺序一般是先在FSC-SSC图中选择目标细胞所在的细胞群,将其设门,然后将门内的细胞显示于PE-Cy5-SSC散点圈中,排除PE-Cy5通道非标记阳性细胞代表的死细胞,将PE-Cy5阴性细胞设门,然后将门内的细胞显示于新的流式图内分析,这时该流式图内的细胞都是活...
fsc代表的是forward scatter,这个参数和细胞的大小成正比,A是area的缩写,H是height的缩写。这是机器在记录信号时所采用的参数(不显示在用户界面,在调试机器的时候可以显示)每个细胞通过激光的时候,机器都会记录一个波状信号(一个拱形的信号),H就是这个拱的高度(代表的是信号的强度),A就是这个...
1.基础设门:大多数FCM临床检验项目均需进行顺序性设门得到单个活细胞,具体操作是:首先使用FSC-A和FSC-H或FSC-W设置单个细胞门排除粘连体细胞;然后单个细胞门内,使用FSC和SSC设置细胞门(大多数FCM临床检验使用新鲜标本,此门可代表活细胞门)排除碎片和死细胞,如果...
图A是所有脾脏单个核细胞的FSC-SSC散点图,设门淋巴细胞群显示于图B和图D所示的散点图中。 图B所示的是脾脏淋巴细胞的CD3-CD19散点图,从图中可以看出,脾脏淋巴细胞主要包括CD3+CD19-T淋巴细胞和CD3-CD19+B淋巴细胞两群细胞,分别占总淋巴细胞的36.4%和58.3%,牌脏中的B细胞要多于T细胞。
图A是所有脾脏单个核细胞的FSC-SSC散点图,设门淋巴细胞群显示于图B和图D所示的散点图中。 图B所示的是脾脏淋巴细胞的CD3-CD19散点图,从图中可以看出,脾脏淋巴细胞主要包括CD3+CD19-T淋巴细胞和CD3-CD19+B淋巴细胞两群细胞,分别占总淋巴细胞的36.4%和58.3%,牌脏中的B细胞要多于T细胞。
FSC和/或SSC参数又派上用场了。 1 FSC-A vs. FSC-H作图, 选出单细胞。 2 FSC-W vs. FSC-H作图, 选出单细胞。 “小白”粉 FSC-A vs. FSC-H和FSC-W vs. FSC-H做的图不一样啊,哪一种比较好?其实除了这两种,还有用SSC-A vs. SSC-H或者SSC-W vs. SSC-H作图去除双联体细胞的。有选择障碍...