ELISA(以耦联有酶的抗体或抗原为标记来检测特异性的蛋白质,尤其是相应的抗原或抗体),免疫组织化学(检测组织中的特异性抗原),免疫细胞化学(通过免疫学方法检测细胞的抗原组成),流式细胞术(通过检测激光所激发荧光来鉴定分离不同类型的细胞)及免疫沉淀(通过抗原与抗体的特异性结合作用来分离相应抗原)。
联科生物 合适的荧光抗体应该怎么选: 高表达抗原对应较暗的染料 低表达抗原对应较亮的染料 联科生物 荧光染料之间的发射光谱重叠尽量小: 如果检测同一种细胞不同抗原,在仪器配置允许的条件下,尽量选择不同激发光激发,如FITC/APC、PE/APC 如果仪器的激光器比较少,则尽量选择光谱重叠小的荧光染料组合 尽量避免复合染料...
在进行流式细胞术样品分析时，抗体的选择至关重要，它们用于识别和区分不同类型的细胞。样品通常首先解离为单细胞悬浮液，以便利用细胞表面蛋白的差异进行分析。抗体通过特异性地结合这些蛋白，如CD3、CD4、CD8等，帮助标记并区分T细胞亚群，如CD3+、CD4+和CD8+。此外，死活细胞鉴定染料的使用确保实验中只...
1)抗原性不被溶血过程改变 2)溶血剂被彻底洗去,细胞和抗体结合的动力反应未受影响 3)所用溶血剂不含固定剂,否则会影响细胞活性及表面标记结果。密度梯度离心法,靶细胞回收较好并可能得到富集,同时去除红细胞、碎片等,但费时,某些重要细胞群体可能被选择性丢失。 细胞与抗体的比例 厂家推荐的抗体用量通常是假定靶细...
流式细胞术(全称Flow cytometry,简称FCM)兴起于20世纪60年代后期,它是通过接受激光照射液流入细胞后的散射光信号和荧光信号反应细胞的物理化学特征,如细胞大小、颗粒度和抗原分子的表达情况等。影响流式实验成功的因素有很多,比如抗体质量,仪器的配置,抗原在待测细胞上的表达丰度,荧光素光谱重叠,荧光溢漏等。其中抗体...
流式细胞术同型对照如何选择抗体? 流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是一种对液流中排成单列的细胞或其它生物微粒(如微球,细菌,小型模式生物等)逐个进行快速定量分析和分选的技术。 一、为什么要用同型对照? 同型对照是使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白,用于消除...
抗体选择/多色组合设计 一般来说,在同一样品上使用的荧光染料越多,从该样品中收集到的信息也越多。在单个样品上组合使用多种荧光染料时,设计需要遵循以下几点基本建议: <10种颜色 1.抗原密度*应该与荧光染料亮度相匹配 ◆最重要的是,低密度或难以检测的标志物应该与明亮的荧光染料配对。
通过使用针对仔细选择的表面蛋白标记抗体，可以实现对样品的更精细的了解，例如区分激活和非激活的T细胞。在下文中，样品将被称为“颗粒”并且可以是任何颗粒或细胞。当颗粒与电流同时穿过开口时，阻抗的变化与颗粒的尺寸相关，这被称为库尔特原理。当颗粒具有低电导率时(如细胞的情况)，这特别有用。Mack Fulwyler于...
检测目标细胞的特定抗原表达水平,尤其是肿瘤细胞上肿瘤特异性抗原的表达水平,对于药物开发过程中药效模型的选择、适应症选择和临床转化都有十分重要的意义。使用荧光标记的特定抗原的抗体对细胞进行染色分析,我们可以通过平均荧光信号值比较不同细胞同一抗原的相对表达强弱;进...
一、流式细胞术(Flow Cytometry)的基本概念 Flow:流动的+cyto:细胞+metry:度量=流动状态下对细胞的检测 流式细胞术是一种利用激光和荧光检测器对细胞进行快速、多参数、定量的分析方法。 二、流式细胞仪的组成和工作原理 1.液流系统:提供动力,使单细胞在鞘液的包裹下在流动状态下经过激光的检测。